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T2毒素免疫亲和柱的用途及操作

时间:2022-12-14      阅读:687

免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的T2毒素,从而对T2毒素样品起到非常针对性的纯化作用,过柱净化后的样品液可直接用于液相进行T2毒素含量的检测。
测定的基础是抗原抗体反应,抗体连接在柱体内,样品经过离心、脱脂后,缓慢的通过T2毒素免疫亲和柱,在免疫亲和柱内毒素与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。用甲醇洗脱T2毒素,然后注入到分析仪器中用于检测。
T2毒素(T2)是由多种镰刀菌产生的一种霉菌毒素。主要污染小麦、大麦、玉米等粮食作物及其制品,对人类健康及畜牧业构成了较大危害。T-2毒素主要影响血液,肝脏,肾脏,胰腺肌肉及淋巴细胞的功能,T-2毒素中毒后的一般临床症状为厌食、呕吐、腹泻、生长停滞、繁殖和神经机能障碍等。
操作:
取出免疫亲和层析柱,将上方塞子取出斜剪断,再插回亲和柱上;
将柱子与泵流操作架上的玻璃针筒连接固定,处理后的溶液上样;
去掉亲和柱下方堵头,调节开关,使液体以1d/s的速度流出;
待液体排干后,更换新玻璃针筒,用10mL水溶液洗涤2次,流速2d/s;
待液体排干后,更换新玻璃针筒,上样1mL甲醇,用样品瓶/玻璃试管接洗脱液,流速1d/s;
洗脱后液体可用于检测。
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