衍生试剂在柱前和柱后的各自特点介绍
时间:2022-12-19 阅读:375
衍生化是一种利用化学变换把化合物转化成类似化学结构的物质。一般来说,一个特定功能的化合物参与衍生反应,溶解度,沸点,熔点,聚集态或化学成分会产生偏离。由此产生的新的化学性质可用于量化或分离,样品的衍生化的作用主要是把难于分析的物质转化为与其化学结构相似但易于分析的物质,便于量化和分离。
衍生一般有两种,一种是柱前衍生,另一种则是柱后衍生,这两者各有各的特点,柱前衍生指的是在分析物经过色谱柱前与衍生试剂反应,反应产物在色谱柱上实现分离,实际分离的是衍生产物,检测的也是衍生产物;而柱后衍生指的是分析物在色谱柱中实现分离后,在衍生池内与衍生试剂反应,检测的是衍生产物。
1、柱前衍生的优点分析:1)相对自由地选择反应条件。2)不存在反应动力学的限制。3)衍生副产物可进行预处理。4)容易允许多步反应的进行。5)不需要复杂的仪器设备。6)有较多的衍生剂可选择。但是柱前衍生所形成的衍生副产物可能对色谱分离造成较大困难,且在衍生化过程中,容易引入杂质,或损失样品。
2、柱后衍生的优点分析:1)分析物可以在其原有的形式下进行分离,容易选用已有的分析方法。2)重现性好,影响因素少,引入物质比较少。但是柱后衍生对于一定的溶剂和有限的反应时间来说,目前只有有限的反应可供选择,除此之外,需要额外的仪器设备,可能有扩散问题。
当试剂与色谱柱流出物混合时,分析分离完成。因此,最重要的是分析物尽快反应。反应时间越长,则反应器所需的体积越大。体积较大时,峰形将变形。为了使谱带扩散小,重要的是要使色谱柱和检测器之间的总时间(以及因此的体积)尽可能的短。如果反应缓慢(超过一分钟),可以使用高温减少反应时间。