聚山梨醇酯20（Polysorbate 20），商品名为吐温20（Tween 20），分子结构式见图2-56，是聚山梨醇酯类中的一种，属于非离子型表面活性剂，具有乳化、扩散、增溶、稳定等作用。在生物制药行业中，聚山梨醇酯常用作蛋白乳化剂，可减少蛋白质之间原有的相互作用，且不破坏蛋白的结构

聚山梨醇酯20含有较多的亲水性基团，没有强生色官能团，采用常用的反相液相色谱-紫外检测器较难进行准确的定性与定量测定。混合液相色谱分离模式蒸发光散射检测器法，是一种较为理想的方法，但由于该检测器灵敏度低，重现性差；液质联用法，分析聚山梨醇酯，由于其成分较复杂，因此定量较麻烦，且仪器使用成本较高；本文尝试采用一款较新的高灵敏度、通用型检测器-电雾式检测器（CAD）进行了分析，CAD是一款通用型的质量检测器。因此，利用这款检测器，检测蛋白药物中的聚山梨醇酯20的含量的方法具有一定的可行性和借鉴意义。

色谱柱：Oasis MAX，30 µm，2.1×20 mm， P/N：186002052；流动相A：2%甲酸的异丙醇溶液，流动相B：2%甲酸水溶液，梯度洗脱，流速1 mL/min，洗脱程序见表2-33。检测方式：（1）Corona Ultra电雾式检测器，氮气（雾化气）压力，35 psi，雾化室温度，30 ℃；采样频率，5 Hz。（2）二极管阵列检测器，波长为280 nm。柱温：30 ℃；进样体积：30 µL；测定结果见图2-57。

本实验建立了蛋白类药物，如某人源化单克隆抗体中聚山梨醇酯20的含量测定方法。经过精密度、重复性、线性等方法学考察，表明本方法准确度高，精密度、重现性较好，在9.4-188 µg • mL-1范围内，线性相关较好（r=0.9994），定量限达1.1 µg • mL-1，可作为药物及制剂中聚山梨醇酯20的含量测定方法。CAD作为质量型检测器，当需要检测更低浓度样品，可以通过适当增大进样体积，或进行柱后有机相补偿，提高化合物的响应，降低定量检出限。同时，由于该检测器响应因子一致，可以通过聚山梨醇酯20的浓度同步对蛋白类药物进行初步半定量分析。总体而言，该方法设计巧妙，原理新颖，操作使用方便，取得了较理想的结果，因此具有较好的推广与借鉴意义。