精液质量分析方案
时间:2024-10-25 阅读:114
精液检查包括精子的形态、运动型和功能检查。
精液检查的主要的目的有:
①评价男性生育功能,为不育症的诊断和疗效观察提供依据;
②辅助男性生殖系统的诊断;
③输精管结扎术后的疗效观察;
④计划生育和科研;
⑤为人工授精和精子库筛选上等精子;
⑥法医学鉴定。
一、标本采集
1.准备工作:①向受检者解精液检查的意义,标本采集方法和注意事项。②标本采集室在实验室附近,室温应控制在20-35摄氏度。室内必须清洁、肃静、无人为干扰;③采集标本前禁欲3-7天。④采集精液前排净尿液。
2.采集方法:将一次射出和全部精液直接排入洁净、干燥的容器内。开始射出的精液精子浓度高。终末部分精子浓度低。采集微生物培养标本须无菌操作。
3.标本运送:精液采集后应立即送检。温度低于20摄氏度或高于40摄氏度将影响精子活动故冬季应注意保温,可将标本瓶装入内衣袋贴身运送。
4.标本采集次数:因精子生成日间变动较大,不能仅凭一次检查结果做诊断。一般应间隔1-2周检查一次。连续检查2-3次。
二、一般性状检查
(一)量
精液液化后测定其排出量。有生育力的正常男性一次射精体积为2-6毫升,平均3.5ml。一次射精量与射精频度呈负相关。若禁欲5-7天射精量仍少于2毫升,视为精液减少;若不射精,称为无精液症(aspermia)。精浆是精子活动的介质,并可中和生殖道的酸性分泌物,以免影响精子活力。精液量减少(精浆不足)不利于精子通过生殖道进入输狼管,影响受精。若一次射精量超过8毫升,精子被稀释,也不利于生育。此可因垂体前叶促性腺素的分泌功能亢进,使雄**的水平升高所致亦可见于禁欲时间过长者。
(二)外观
1.颜色和透明度:正常精液呈灰白色,自行液化后为半透明的乳白色,久未射精者可略显浅黄色。凡精液呈鲜红、淡红、暗红或酱油色并含有大量红细胞者称为血精,可能由于前列腺和精非特异性炎症、生殖系结核、肿瘤或结石所致黄色或棕色脓性精液见于前列腺炎和精囊炎。
2.粘稠度:正常情况下新排出的精液迅速凝成胶胨状,然后逐渐变化。若新排出的精液呈米汤样,可能为先天性精囊或精囊液流出管道阻塞所致精液稀薄,粘稠度下降,也要见于精子浓度太低或无精子症时。
(三)气味
正常精液具有栗花和石楠花的特殊气味,由于前列腺液产生。
(四)液化时间
精液液化时间是指新排出的精液人胶胨转变为自由流动状态所需的时间。有关精液凝固与液化的过程极其复杂,有相当多的物质参与,例如前列腺与精囊分泌物等都可能影响其时间长短,此外也受温度影响。在室温下,正常精液排出后60分钟内液化。前裂腺炎时,由于其功能影响,导致液化时间延长,甚至不液化,不液化可抑制精子活动力,而影响生育能力。
三、化学检查
精浆中的一些生化标志物可反映副性腺性功能。例如柠檬酸、锌、谷氨酰胺转酞酶和酸性磷酸酶反映前列腺功能;果糖和前列腺素反映精囊功能;甘油磷酸胆碱和α葡萄苷酶反映附睾功能。这些特异性标志物总排出量降低反映分泌功能低下,可用以评价男性副性腺的分泌功能。
(一)PH
精液PH测定应在射精后1小时内完成,放置时间延长,PH下降。正常精液PH为7.2-8.0。如PH<7并伴少精症,可能是由于输精管、精囊或附睾发育不全。
弱碱性的精液射入生殖道后可中和生殖道分泌物中的有机酸,利于精子游动。当PH<7或>8时均影响精子活动。
(二)果糖
精浆中的果糖来自精囊液,由精囊所分泌。它是精子活动的能源。精子轴丝收缩依赖STP供给能量,而ATP可由果糖分解产代谢产生,故精浆果糖浓度减低将使精子活动力减弱,影响受精率。
(三)酶类
1.酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)精浆中的酸性磷酸酶几乎全部来自前列腺,属前列腺酸性磷酸酶。因此测定精浆中ACP有助于了解前裂腺功能和诊断。前列腺炎时PAP活性减低;前列腺癌和前列腺肥大时,PAP活性可增高。PAP有促进精子活动的作用。精浆中PAP减低,精子活动减弱,可使受精率下降。
[参考值] >200U/一次射精(β-硝基酚法)
2.乳酸脱氢酶-X(LD-X)
精液中有6种乳酸脱氢酶同工酶,其中LD-X活性*强,约相当于LD总活性的1/3。LD-X在是存在于精母细胞、精子细胞和精子线粒体中特异酶,具有组织特异性,对精子生成、代谢、获能、活动能力和受精过程均有重要作用。
LD-X测定常用电泳法,但较繁琐。1988年国内建立了直接比色法,方法方便,易于普及。
[参考值] LD-X/LD>40%
3.精子顶体酶
存在于精子项体内,是一种蛋白水解酶,在受精过程中起重要作用,可用N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯-醇脱氢酶(N-benzoy –L-arginine sthyl esteralcohol dehydrogenase,BAEE-ADH)法测定。
[参考值 ] BAWW-ADH法(X±s)36.72±21.43U/L
(四)精浆锌
精浆锌测定可作为评价男性生育功能和诊治不育症的参考指标之一。
[参考值] Zn(X±s)2.4μmol/一次射精
四、显微镜检查
(一)涂片检查
涂片检查也是检查输精管结扎效果的常规方法。一般于术后经5-6次射精,原贮于附睾和精囊内的精子已排净。通常于术后第六周开始检查。每周1-2次。若连续三次查不到精子则可认为手术成功。否则说明手术失败。
(二)精子活动力和存活率
1.活动力:精子活动力(sperm motility)是指精子向前运动的能力。WHO将其分为四级:A:精呈前向运动;B:慢或呆滞的前向运动;C:非向前运动;D:不动。
活动力正常值:射精后60分钟内,精子50%或更多具有前向运动,25%或更多具有快速前向运动。精子活动力减弱或死精子过多是导致不育的主要原因。
2.精子存活率以“活”粗子比率表示,若不活动的精子较多,应时持体外活体染色检查,以鉴别其死活。活精子的细胞膜能阻止伊红Y、台盼蓝等染色剂进入细胞内,故不被染色;死精子细胞膜完整性受损。失去屏障功能,可被染色成橘红或蓝色。有生育力男性伊红染色法的活精子率≥75%。
(三)精子数量
通过精子计数可求得精子浓度,乘以精液量还可求得一次射精排出的精子总数。正常成年男性,精子数量个体间的差异较大,精子浓度为(50-100)×109/L。<20×109/L为少精子症;正常人一次射精排精子总数为≥40×106。精子数量减低可见于:①精索静脉曲张;②有害金属和放射性损害;③先天性和后天性,如睾丸畸形、结核、淋病、炎症等);④输精管、精囊缺陷;⑤老年人在50岁以上者精子生成减少。
(四)精子形态
通常用于精子形态学检查的方法的有两种,一种是制成新鲜湿处副县长相差显微镜观察;加一种是将精子固定、染色后用亮视野光学显微镜观察。两**法检查的精子形态无明显差别,染色后精子头可能稍有缩小。
1.正常精子形态检测政党精子形态的应遵循严格标准:①正常精子头部呈椭圆形,其正常标准为头部长度为4.0-5.5μm,宽为2.5-3.0μm,长与宽的比值为1.5-1.75项体区占头部的40-70%;②必须不存在颈、中段或尾部的缺陷;③细胞质微粒不大于正常头部的1/3;④将所的处于边沿异常状态的清子均列为不正常。
2.有缺陷精子:用这种形态学分析方法考虑的精子细胞功能部位,因此认为没有必要常规的去区分所有头部大小和形态之间可划或尾部缺陷之间的变异如果大多数精子细胞中出现某一种部位的异常,则应对这一普通的缺陷给予注释。需记录的缺陷有:
(1)头部形状、大小缺陷:包括大头、小头、锥形头、梨头、无定形头、空泡样头(头部大于20%区域出现不着色的空泡区、)双头或以上缺陷的联合体。
(2)颈、中段缺陷:包括缺尾可见到游离或脱落的头部,未附着或弯曲尾尾与头部长轴结呈90度角,肿胀、不规则、弯曲的中段,异常薄的中段无线粒体鞘或以上任何类型缺陷的联合体。
(3)尾部异常:包括短尾、多尾、发夹状尾、断尾、宽度不规则或卷尾、或尾部伴有末端微滴,或以上任何类型缺陷的联合体。
(4)细胞质微粒:大于正常头部的面积的1/3。细胞质微粒一般位于颈可中段部分,也有未成熟精子微粒沿尾部分而布在不同部位。
精子形态
(五)未成熟的生殖细胞
未成熟的男性生殖细胞即生精细胞,包括精原细胞、初级精母细胞、次级精母的细胞。这神经过敏细胞胞体较大,常有1-2个核,有时易与中性粒细胞相混淆,尤其是用未染色精液镜检时不易识别,需在时可用过氧化物酶染色鉴别,前者为阴性,后者为阳性,正常人未成熟精细胞<1%。当曲细精管受到**或其它因素的影响或损害时,精液压中可见较多的病理型生精细胞。
五、微生物学检查
检查应在常规的条件下,采集精液于无菌容器内,常规涂片进行革兰氏染色或抗酸染色检查等,亦可于37摄氏度液化30分钟后作**培养;需氧培养结果>1000CFU/ml方有临床意义。
近年来淋病奈瑟菌引起的生殖道感染有所增加,许多实验室开展了淋球菌快速检查项目,如直接荧光抗体染色等,亦有应用PCR技术检查者。直接荧光抗体染色灵敏度高,但特异性差,PCR技术需严防污染。
六、精子功能检查
常用的试验有:体内穿透试验、体外穿透试验(in vitro,penetration test)。