人精氨酸酶试剂盒

　上海乾思生物公司人精氨酸酶试剂盒细胞近3000种，来源于美国ATCC,细胞都是经过严格质量控制，在中国大陆努力搭建正牌细胞与国内广大科研人员之间的沟通桥梁。为您提供外，还有更多相关实验产品，标准品，细胞株和实验技术服务等等前期后续服务。选择正确的实验试剂或材料是实验成功的关键。

　购买上海乾思生物细胞注意事项（乾思生物）发布

　　一、客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；

　　收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。

　　二、如为贴壁细胞，请在显微镜下观察细胞密度：

　　1. 未超过80%汇合度时，用75%酒精（建议配置75%酒精的水也是灭菌超纯水，喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作；然后打开盖子，先把培养基吸出10ml左右，放在离心管里，然后瓶口过火（严禁直接倾倒），这样可以保证不污染，再用10ml的移液管，将剩余的培液全部吸出，放于离心管中，培养瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培养16hr(时间根据细胞生长情况调整）之后，传代或者冻存。

　　2. 超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。具体步骤如下：

　　1) 弃去培养液，用3ml PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次；

　　2) 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于T25培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来；

　　3) 加入6-8ml*培养基，吸出，分到新的培养瓶中，按要求分瓶。

　　三、如为悬浮细胞，吸出培养液，1000转/分钟离心5分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。

　　注意：换液时一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

　　四、细胞出现问题，可重发的情况有哪些？判定标准是什么？

　　（1）细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、破损、漏液等，重发；

　　（2）冻存的细胞复苏后，绝大多数细胞未存活，重发；

　　（3）存活的细胞静置24小时后，绝大多数细胞未存活，重发；

　　（4）冻存的细胞复苏后或存活的细胞静置4小时后并且未开封，出现污染，重发；

　　（5）视具体情况而定。　

　　Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌；部分产品现货，超低比价，另常备 Trizol DMSO lipo2000 lipo3000 SC-2004 SC-2005常备现货 ；货期短，价格优，售后齐全。

　　  细胞培养技术3个原则：1、用自己的一套试剂，不要和别人混用；2、勤观察细胞，像养宠物一样喜爱和关心；3、有规律地换液和传代，不要“三天打鱼，两天晒网”。
　　质量可靠，售后有保障

　　★我库细胞近3000种，来源于美国ATCC,细胞都是经过严格质量控制。

　　冻存细胞时间为5-7个工作日，活细胞为7-15个工作日。

　　★由于细胞库现有细胞类目多，为了不出现混乱错误，需要了解相关细胞价格及详细资料请老师，对您造成的不便还请见谅！

一、细胞的复苏：
非原代培养的细胞一般冻存于液氮之中，需要培养时要先从液氮中取出使之复苏。细胞复苏的原则——快速融化：必须将冻存在－196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。
具体操作如下：
1、实验前准备：
1.1、将水浴锅预热至37℃，并将含10%FBS的培养液置于其中预热；
1.2、用75％酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。
1.3、在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。
2、取出冻存管及迅速解冻：
2.1、根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。
2.2、从液氮罐中取出细胞盒，取出所需的细胞，同时核对管外的编号。
2.3、迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻，并要不断的摇动，使管中的液体迅速融化，约1-2min后冻存管内液体*溶解，取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁，再拿入超净台内。
3、平衡离心 将细胞悬液吸到离心管中，1000～1500rpm离心3分钟；
4、制备细胞悬液 吸去上清液，加入10 ml培养液，用吸管轻轻吹打均匀，使细胞悬浮；
5、细胞计数 细胞浓度以5×105/ml为宜。
6、培养细胞
将复合细胞计数要求的细胞悬液吸到培养瓶中，将培养瓶放入37℃和5％CO2的培养箱内培养（略微拧松培养瓶盖），换液的时间由细胞情况而定。通常，除少数特别注明对DMSO 敏感的细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 可直接放入含有10-15ml（5－10倍）新鲜培养基的培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附的问题。