前言

克百威是高效而广谱的杀虫农药，进入环境后，在环境中残留时间长，在土壤中的半衰期为30~120d，其中沙土中为30d，肥沃土壤中40d，泥中为80d，由于其在水中溶解性较强，可随水体流动而造成污染扩散。该农药对鸟类毒性非常强，长期大面积使用会对湿地鸟类造成严重威胁。人体接触被污染的环境或食用被污染的食品和水源会导致慢性中毒。

本文参照《蜂产品中克百威残留量的测定 液相色谱-串联质谱法（征求意见稿）》，利用EZsep™QuEChERS（6gMgSO4、1.5gNaCl， 货号：PZ13059）和EZsep™QuEChERS（50mgPSA、50mgC18、150mg MgSO4， 货号：PZ13005）净化样品，再通过高效液相色谱串联质谱检测进行检测，建立了一种对蜂产品中克百威残留量的分析方法。

1、       实验过程

1.1 仪器与试剂

EZsep™QuEChERS（50mgPSA、50mg C18、150mgMgSO4，货号：PZ13005），北京莱伯帕兹检测科技有限公司；

EZsep™QuEChERS（6gMgSO4、1.5 gNaCl，货号：PZ13059），北京莱伯帕兹检测科技有限公司；

4500质谱系统，SCIEX公司；
EZsep™ MAX固相萃取柱（60 mg/3mL，货号：PZ12802），北京莱伯帕兹检测科技有限公司；

冷冻离心机，GL-20G-Ⅱ，上海安亭科学仪器厂；

乙腈（色谱纯），购自赛默飞世尔科技（中国）有限公司；

甲酸、乙酸、乙酸胺、氯化钠、无水硫酸镁等化学品均为分析纯或以上，购自国药集团化学试剂有限公司；

1.2 工作液配制

51种农药混标：10μg/mL，溶剂为乙腈，购自坛墨质检标准物质中心。
51种农药标准使用液：移取51种农药混标0.1mL，用乙腈稀释至10mL容量瓶中，配制成浓度为100ng/mL的51种农药标准准使液。依次移取100ng/mL的51种农药标准使用液0.01、0.02、0.05、0.1、0.2mL，分别置于10mL容量瓶中用甲醇定容至刻度，得到浓度依次为0.1μg/L、0.2μg/L、0.5μg/L、1.0μg/L、2.0μg/L的标准系列工作液。
1.3 实验部分

1.3.1 样品制备

取蜂蜜试样2g，置于50mL聚丙烯离心管中，加入10mL水、涡旋30s混匀后静置10 min，加入5mL1%乙酸乙腈溶液，涡旋提取3min，加入EZsep™QuEChERS（6gMgSO4、1.5gNaCl，货号：PZ13059） 后立即手动剧烈振摇1min，随后以5000r/min离心5min，取上清液1.0mL待净化。

1.3.2 固相萃取净化取

1.3.1待净化液于装有EZsep™ QuEChERS（50mgPSA、50mgC18、150mg MgSO4，货号：PZ13005）的2mL离心管中，涡旋混匀30s后以5000r/min离心5min,吸取上清液0.5mL与0.5mL水涡旋混匀，经0.22um滤膜过滤至进样小瓶，供LC-MS/MS测定。1.3.1 LC-MS/MS仪器条件色谱柱：Shim-pack Velox C18（2.7μm，2.1*100mm）；柱温：40℃；检测方式：多反应监测（MRM）；流动相：A：0.1%甲酸-5mmol/L乙酸铵水溶液；B：乙腈；流速：0.4mL/min；进样量：2μL。

表1 流动相梯度洗脱表

2、       实验结果

表2 加标回收率

图1 标液色谱图

图2克百威标准曲线图

图2 3-羟基克百威标准曲线图

3、       实验结论

本实验使用EZsep™QuEChERS（6gMgSO4、1.5gNaCl，货号：PZ13059）和EZsep™QuEChERS（50mgPSA、50mgC18、150mg MgSO4，货号：PZ13005）对蜂产品中克百威进行净化，再通过高效液相色谱串联质谱进行测定，该方法的加标回收率在94.2%~102.8%之间，RSD为1.4%~ 3.2%，满足标准要求。测试结果说明EZsep™QuEChERS产品能很好的完成方法中的净化工作，并且结果稳定、可靠。

4、       参考文献

[1] 《蜂产品中克百威残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 （征求意见稿）》