TTC染色

一、TTC染色原理：TTC（2，3，5—氯化三苯基四氮唑）是脂溶性光敏感复合物，它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体，与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色，而缺血组织内脱氢酶活性下降，不能反应，故不会产生变化呈苍白。

二、新鲜组织切片制备及染色实验步骤：
1、取材：动物麻醉后立即取新鲜组织(如脑、心脏) ，不经固定液固定，将组织直接放入-200速冻20-30min，如果不急用,可以暂时放置-80°C冻存。
2、组织块切片：将冻好的组织稍解冻，用莱卡刀片手动切片，厚度2-3mm为宜，切面整齐。
3、TTC染色：将切片放入提前预热好的的TTC孵育液中，放入37C水浴锅中避光孵育15-30min，间隔5-8min轻轻摇动组织，使其均匀接触到染色液,并观察染色结果。
4、拍照：组织成色后，加入固定液终止反应，并避光保存组织， 照相机拍照。

三、TTC染色判读：
组织正常区呈红色，梗死区呈苍白色。

四、注意事项：
1、标本越新鲜越好，勿固定，刀片宜薄而锋利， 在冰箱中速东的时间以能顺利切片为宜，保持切片平整。
2、染色后的标本浸存于国定液中避光保存，染色结果能保存数月 ，在阳光下易褪色；
3、TTC染色波避光4°C可保存一个月，使用前先复常温。