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2016/8/10 13:15:27GIBCO胎牛血清16000-044 作用:
1、提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2、提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
3、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
4、是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5、起酸碱度缓冲液作用。
6、提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
胎牛血清是品质zui高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分zui少;牛血清是细胞培养中用量zui大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。
GIBCO胎牛血清16000-044 常见问题:
1、改变培养液的pH值 牛血清的pH理论值为7.0~8.0,培养基在加入规定量的碳酸氢钠后(即达到细胞生长所需要的渗透压),再加入10%的牛血清,一般会使培养液的pH值发生改变。因此在使用过程中应注意pH的变化,如有必要可用1mol/L NaOH或1mol/L HCl调pH到所需值。
2、由于血清的营养成分丰富,非常适合细菌、真菌和支原体等生长。国产血清大部分采用手工分装,因此容易把微生物带入而使得血清被污染。使用前如果没有及时发现,将会把污染物带入正在培养的细胞中,而使得细胞不能正常生长。
3、血清在贮存解冻过程中会产生沉淀,这是由于血清中含有大量脂蛋白、纤维蛋白及多肽类物质,在-15℃冷冻保存解冻后就会自然形成沉淀,随着保存时间的延长,沉淀量会增加。因此在融化血清时一般应先在4℃放置使之解冻,然后放在室温使血清*融化,以避免沉淀的增加。添加血清时应避免把沉淀加入培养液,否则由于沉淀的存在会使得所培养的细胞产生大量黑点,或者细胞表面将会覆盖一层油状物质,影响细胞的正常生长。为减少血清的损失,可以把有沉淀的血清收集起来进行离心处理,将上清液加入培养液使用(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。
正确储存方法:将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内(由于血清结冻时体积会增加约10 %, 必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形),再放回冷冻。
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黑胶虫的由来:
在细胞培养的时候,有时会在400倍显微镜下看到小黑点在动,小黑点有时呈点状,有时呈小的片状,运动形式为在原地振动,类似布朗运动,这种小黑点既不是细菌、霉菌,也不是支原体,目前业内人士称其为“黑胶虫”。
黑胶虫究竟是一种生物还是非生物,本身就存在争议。黑胶虫一般是存在血清里的,而血清通常是经过0.1μm滤膜过滤的,所以血清里不可能存在细菌、霉菌及支原体等微生物。若说黑胶虫不是生物,然而它会不断增多,达到一定数量时会与细胞竞争性生长,与细胞竞争培养基中的营养,从而使得细胞营养不足而死亡。
关于黑胶虫的两种理论:
(1)支持黑胶虫是生物的理论:根据国外相关资料,黑胶虫是一类称为“纳米细菌”的微生物。纳米细菌是一种具有细胞壁的微生物。其体直径约为200纳米,是可于正常光学显微镜下成像的物件zui小尺寸,大大低于细菌的理论下限。1996年,尚未发现纳米细菌时,这个大小被假定的理由是“现时所知生物需要用到的zui小体型”。有关它们为生命体的报告是相当具冲击性的。假如这些微小的东西是生存着的,那么就意味着一种与细菌*不同的崭新生命形式被发现。
(2)支持黑胶虫是非生物的理论:反复冻融或灭活的血清,更加容易出现沉淀和黑胶虫,所以推测,所谓的“黑胶虫”其实就是血清中的某些蛋白成分和矿物质形成的晶体,在培养体系中,镜检见到的运动其实是这些物质在溶液中做“布朗运动”。随着细胞消耗培养基,这些物质析出的越来越多,zui后细胞所用的营养消耗完,细胞容易死亡。黑胶虫如果是生物,怎么没有人完成相关的基因测序工作?此外,在维基百科上也没有“黑胶虫”的解释,表明科学界对此说法的不认同。
所以说不管怎么样,选择一款好血清总归会避免“黑胶虫”的出现,试剂销售是一家专门做特卖血清的专卖店,专做好血清,专做性价比高的血清!