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ELISA试验的稳定性问题

上海谷研生物实验室

2016/9/14 14:34:39

ELISA试验的稳定性问题
做ELISA实验时,结果老是重复性不上,相同的材料和相同的操作方法做出的结果就截然不同,上午做时其OD在1.5,下午做时就是0.9了,所以都没有办法下结论,为什么会差异这么大呀
(1)多设平行空孔,请别人代劳,以判断究竟是否操作问题
(2)对于活性非常高的包被物和酶标记物,如果*次选择的范围恰好在其平台位置边
缘,那么在重复的时候,每次取样带来的微量误差就很容易导致大的偏差了,特别是线性比较好的原料试剂,这个就很正常了。建议每次取样的时候只使枪尖一点点位于液面下,以免吸嘴外面沾有少量抗原or抗体or酶而使结果重复不上。
2、酶不稳定,有何高招?
(1)保存浓度尽量高些,
(2)另外可以添加牛血清白蛋白等蛋白保护剂,以避免其被吸附或沉降以及被蛋白酶所降解。
(3)加入50%甘油-20度保存、避免反复冻融。

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