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TMB单组分显色液使用方法

北京索莱宝科技有限公司

2016/10/29 16:42:27

目前酶免疫分析(EIA)技术,已被广泛应用于抗原,半抗原或抗体的定量或定性检测分析。辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是酶联免疫分析技术中常用的一种酶,由于3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)在HRP的显色反应体系中,比其它色原具有更高的灵敏度且无至癌性而被广泛应用。TMB主要应用于酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫斑点杂交或者免疫组化以及氯和过氧化氢的检测分析。为了满足不同的试剂盒产品研发与生产以及科研需求,本公司专门研制了针对不同类型的基于HRP的免疫分析用TMB显色液。

TMB单组分显色液特点:    

即用型:无需混合,方便快捷,减少误差   

灵敏度高:不低于A.、B液  

 稳定性好:2-8℃保存,有效期不低于36个月;显色终止后读数稳定   

背景低:底物溶液在650nm检测时检测OD值小于0.04   

质量可靠:产品批间差异小   

外观:本试剂一般情况下为无色,有时略显浅蓝色或浅黄色

TMB单组分显色液使用方法:     

用适当的干净容器(用纯净水反复冲洗),倒出适量的单组分TMB显色液,待达到室温后即可使用。

加液:加完HRP结合物并孵育一定时间后,用适当洗涤液洗板3-5次,每孔加TMB显色液100ul。 根据个人实验需要,在室温(15-25℃)或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间,直至显色至预期深浅。

终止:加入等体积的1M 盐酸或硫酸溶液终止反应,孔中反应液由蓝色变为黄色。

读数:终止反应后30分钟内在450nm处测定吸光值。

注意:如果出现高的反应背景或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀,可在终止后马上读数;或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物。

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