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2017/7/31 13:24:26生长促进曲线的测定,是反映胎牛血清(FBS)功能的方法之一。下面缔一生物/缔一生物专家根据美国药典的方法,简要描述一下美国药典关于FBS生长促进曲线的规定。
细胞生长速率的测定经常用于确定细胞对外源刺激的反应。定量评估细胞的生长状况是用于监测培养条件一致性的重要方法。细胞传代的*浓度,*接种密度和倍增时间都是可被量化的指标,并可用于观察趋势。因此,了解细胞的生长动力学对于设计细胞生物学实验非常重要。而细胞生长状况在潜伏期、对数期和平台期都存在不确定性,在这三个生长阶段记录细胞生长状况,可用于确定细胞群体倍增时间和细胞周期。细胞进入平台期后可能降低生长速率和改变形态,发生极化和分泌更多的细胞外基质,使得细胞很难从基质上分离下来,细胞在对数期后期的产量zui高,可重复性。
前期细胞接种方法,请见文章《如何准备用于生长促进曲线测定的细胞》。
测定生长促进曲线,需在第0,1,2,3,4,7天进行活细胞计数。
计算平均的活细胞数(贴壁cell/cm2或悬浮细胞/ml)和活力细胞百分比。用半对数坐标制图,活细胞数对数在Y轴,时间(天)在X轴。利用跨过3个或3个以上时间点的线性生长曲线计算倍增时间。
要计算可靠的倍增时间,截取的生长曲线线性值R2应≥0.98。待测样本的倍增时间应不少于美国药典FBS参考标准品的90%。
综上所述,您是不是已经对美国药典关于FBS生长促进曲线的规定,有所了解。如果还有其他疑问,请咨询缔一生物/缔一生物资深专家。