ELISA试剂盒各首要构成试剂的挑选

ELISA试剂盒各首要构成试剂的挑选包括以下四点，我们一同来看看。
(1) 固相载体的挑选：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其方法可所以凹孔平板、试管、珠粒等。现在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不论何种载体，在运用前均可进行挑选：用等量抗原包被，在同一试验条件下进行反响，查询其显色反响是不是均一性，据此判明其吸附功能是不是杰出。
(2) 包被抗体的挑选：ELISA试剂盒将抗体吸附在固相载体外表时,央求纯度要好,吸附时一般央求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时刻及其蛋白量也有必定影响,一般多选用4℃ 18～24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定：即用不一样的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后，在其它试验条件相一同，查询阳性标本的OD值。挑选OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。关于大都蛋白质来说一般为1～10μg/ml。
(3) 酶符号抗体作业浓度的挑选：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶符号抗体部份)。然后再固定其它条件或选用“方阵法”(包被物、待检样品的参阅品及酶符号抗体分别为不一样的稀释度)在正式试验系统里地滴定其作业浓度。
(4) ELISA试剂盒酶的底物及供氢体的挑选：ELISA试剂盒对供氢体的挑选央求是价廉、安全、有明显地显色反响，而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌效果，应留神防护。有条件者应运用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是现在较为满足的供氢体。底物效果一段时刻后，应参与强酸或强碱以停止反响。一般底物效果时刻，以10-30分钟为宜。底物运用液有必要新鲜制造，尤其是H2O2在临用前参与。