详述紫外分光光度计测DNA浓度的方法

紫外分光光度计如何来测DNA浓度呢？以下将由上海旦鼎技术人员为您详细讲解，欢迎浏览以下详细内容！

将待测DNA溶液作适当稀释，选用光程为0.5cm的石英比色杯，在紫外分光光度计上测定OD260和OD280的值，按以下公式计算DNA浓度。

DNA浓度（ng /µL）=OD260×50×稀释倍数

当OD260/OD280< 1.8，表示蛋白质含量较高

当OD260/OD280> 2.0，表示RNA含量较高

当OD260/OD280=1.8～2.0，表示DNA较纯

TE缓冲液：10mM Tris-HCl（pH 8.0）；1mM EDTA（pH 8.0）

CTAB提取缓冲液：100mM Tris-HCl(pH=8.0)，20mM EDTA，1.4M NaCl，2%CTAB，2%ß-巯基乙醇

1×TBE缓冲液：Tris 10.8g、硼酸5.5g、EDTA(0.5M，pH8.0) 4mL，加H2O至1000mL

10×上槽缓冲液：Tris108g、硼酸55g、EDTA（1M，pH8.0）20mL，加H2O至1000mL，稀释10倍使用

5×下槽缓冲液：Tris 54g、无水NaAc 205g、硼酸27.5g、EDTA（0.5M，pH8.0）20mL，加H2O定溶至1000mL，稀释5倍使用Loading buffer：甲酰胺49mL、EDTA（0.5M，pH8.0）1mL、溴酚蓝0.125g、二甲苯氰0.125g，混合备用