一旦在
优级胎牛血清细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:
1.细胞生长过老,破碎的细胞残骸;
2.血清质量不好,反复冻融的结果;
3.配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;
4.配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;
5.培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。
优级胎牛血清细胞培养中如何防止黑点生成?
1.尽可能地减少血清冻融次数;
2.培养基无需37℃水浴;
3.培养基保持佳PH值7.0-7.2;
4.严格控制配制培养基的水质,容器定期刷洗;
5.掌握细胞传代的佳时机,细胞切勿生长过老。