钱美圆，仇文军，徐波
应用技术研究中心
正相分离是分离纯化合成有机小分子样品zui为常用的分离方法，在正相分离模式中，采用极性较强的固定相与极性较弱的流动相作为组合，利用样品分子在这两相中分配比的差异对样品和杂质进行分离。薄层液相色谱（Thin layer chromatography，以下简称TLC）是广大有机合成人员在进行正相分离实验时普遍采用的分离条件探索方法，根据样品在TLC板上的迁移率计算出相应的比移值Rf，然后依据样品中各组分Rf值的差异以及上样量，研究人员凭借经验确定所需要的Flash柱的类型，并在后续分离实验中不断优化洗脱梯度参数，zui终完成对样品的分离制备。
上述实验流程是一个典型的经验依赖性很强的工作，需要研究人员具备丰富的实践经验，对于大多数刚刚接触有机合成和Flash制备色谱的实验菜鸟来说，这里面的“套路”显得颇为高深。那么，有没有一种简单易学、便于快速上手的实验装置呢？答案是肯定的。今天就为大家介绍来自常州三泰科技的智能快速液相制备色谱系统——SepaBeanTM machine，在版本的SepaBean控制软件中，整合了分离方法自动推荐的功能，可以根据样品量以及样品的TLC信息自动推荐适合的分离柱，并自动生成经过优化的洗脱梯度条件，从而大大简化了实验流程，提高了广大研究人员的工作效率。下面仅以一例简单介绍上述功能的实现方法。
首先配制标准样品：称取苯甲酸甲酯5.0 g，邻苯二甲酸二甲酯10.0 g，邻苯二甲酸二乙酯10.0 g，将上述三种样品混合后溶于20 mL乙酸乙酯，待样品充分溶解后加入正己烷，稀释至100 mL。
然后在TLC板上进行样品点板，展开剂为石油醚/乙酸乙酯（PE : EA = 10 : 1），得到如图一所示的点板结果，并计算出各样品组分的Rf值。
图1. 混合物样品的TLC点板结果
接下来在SepaBean控制软件中输入样品的TLC信息，选择所用的展开剂及比例，并输入样品各组分的Rf值，如图2所示。
图2. 在SepaBean控制软件中输入样品的TLC信息
图3. SepaBean控制软件中的分离方法设置页面
待样品的TLC信息输入完成后，进入下一步的分离设置，如图3所示。可以看到洗脱梯度已经由软件自动生成。输入样品的上样量后，在分离柱选择菜单中将出现推荐的分离柱，用户根据样品的性质可以自行决定是否从中选择。对于分离难度不高的样品，软件推荐的分离柱即可满足要求。接下来设置好流速、检测波长、收集方式、收集试管架类型及收集体积等参数后，即可开始分离实验。表1所示为本次制备纯化实验的参数设置。
表1. 制备纯化实验参数设置
图4. 混合物样品的Flash制备分离图谱
图4所示即为本次Flash制备纯化实验的分离图谱，从中可以看出样品中三个组分均得到了基线分离，表明仪器控制软件自动生成的洗脱梯度参数比较合适，用户仅需一次进样分离实验即可获得满意的结果，无需再进行繁琐的分离条件优化工作，从而大大提高了工作效率，并且节省了大量宝贵的时间，降低了溶剂消耗。
常州三泰科技有限公司推出的SepaBeanTMmachine是一台智能化快速液相制备色谱系统，具有操作便捷、易于使用、内置化学知识数据库、自我学习及安全的信息共享等特点，相关特性已申请了一系列发明或实用新型。为了让仪器更加智能化且便于使用，我们还将开发一系列新功能，敬请期待！
