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2018/7/4 10:08:37HFF,人包皮成纤维细胞消化要有个度
产品代号:HFF
中文名称:人包皮成纤维细胞
种属:人
是否鉴定:已鉴定
库存状态:现货
慧颖生物提供2000种类细胞株细胞系,400多株已鉴定细胞,涉及种属:人,大鼠,小鼠,兔子,鱼,牛,仓鼠等,我们提供好的产品,好的服务,好的技术,复苏周期短,*,细胞状态良好,饱满,有光泽,无支原体。
HFF,人包皮成纤维细胞消化要有个度
细胞培养,尤其是细胞系的培养,就细胞消化而言,多做、善于总结,就可以把细胞养的越来越好
绝大部分细胞消化只要用胰酶润洗一遍即可:
吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。
什么算是消化好了呢?
不需要把细胞全部消化成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了。
一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。
细胞就是*成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。
一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液。细胞只要能从基质上脱离下来,即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右)是正常的,不要再去延长消化时间,等待单细胞悬液出现。
比较难消化的细胞:
润洗方法5min还不能消化,以结肠癌细胞为例,比如HCT15、LS411和KM12细胞,胰酶消化,一般10 cm 培养皿,一次多加入300ul-500ul就足够了。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,用胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
常规的细胞实验,受消化影响不是很大:
如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验,比如病毒包装,对细胞代数,对细胞状态要求*。这个时候,胰酶消化,就是润洗,都会对细胞包装病毒的能力有影响,传代次数一多,细胞包装能力就会逐渐下降。这个时候都不用胰酶消化,用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响细胞外基质相关酶的活性,来使得细胞脱离基质附着表面,但不切割任何蛋白。
EDTA的作用:
许多人不用胰酶,只用EDTA,或者用胰酶/EDTA联合作用。这里要明白,胰酶切割细胞外基质的一些负责粘连和附着的蛋白,而EDTA通过螯合Ca离子,作用于整联蛋白的活性,所以EDTA的作用更加温和。有的人在胰酶里添加一些EDTA,或者对付特别难消化的细胞,添加多一些EDTA,就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果10min还消化不*的话),而应该想其它办法。
PBS洗涤:
消化之前用PBS洗涤,是常见的操作,因为血清中含有抑制胰酶的蛋白。对于一些难消化细胞,可以配制不含Ca,Mg离子的PBS,因为这些离子也会抑制胰酶的活性。但对于绝大部分细胞用胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化,不需要配制不含Ca,Mg离子的溶液。
细胞代号 细胞名称 种属 鉴定结果
HFF,人包皮成纤维细胞消化要有个度
编号 中文名称 是否鉴定
5637 人膀胱癌细胞 人 √
7703 人肝癌细胞 人 √
143B 人骨肉瘤细胞 人 √
22RV1 人前列腺癌细胞 人 √
293FT 人胚肾细胞 人 √
293T 人胚肾细胞 人 √
435S 人乳腺癌细胞/人黑素瘤细胞 人 √
453 人乳腺癌细胞 人 √
6T-CEM 人T细胞白血病细胞 人 √
769-P 人肾细胞腺癌细胞 人 √
786-O 人肾透明细胞腺癌细胞 人 √
95-D 人高转移肺癌细胞 人 √
97H 人高转移性肝癌细胞 人 √
A172 人胶质母细胞瘤细胞 人 √
A2058 人黑色素瘤细胞 人 √
A2780 人卵巢癌细胞 人 √
A375 人黑色素瘤细胞株 人 √
A431 人表皮癌细胞 人 √
A498 人肾癌细胞 人 √
A549 人非小细胞肺癌细 人 √
A-673 人横纹肌肉瘤细胞 人 √
ACHN 人肾细胞腺癌细胞 人 √
AGS 人胃腺癌细胞 人 √
AN3CA 人子宫内膜腺癌(转移)细胞 人 √
ARH-77 人浆细胞白血病 人 √
ARO 没有,找不到信息 人 √
ARPE-19 人视网膜上皮细胞 人 √
B-CPAP 人甲状腺癌细胞 人 √
BEAS-2b 人正常肺上皮细胞 人 √
BEWO 人绒毛膜肿瘤细胞 人 √
BGC-823 人胃腺癌细胞(低分化) 人 √
BT-474 人乳腺导管癌细胞 人 √
BT-549 人乳腺管癌细胞 人 √
BXPC-3 人原位胰腺腺癌细胞 人 √
C-33 A 人子宫颈癌细胞 人 √
C643 人甲状腺癌细胞 人 √
C8166 人T淋巴细胞白血病细胞 人 √
Ca Ski 人宫颈癌肠转移细胞/人宫颈癌上皮细胞 人 √
Caco2 人结直肠腺癌细胞 人 √
CAKI-1 人肾透明细胞癌皮肤转移细胞 人 √
cal-27 人舌鳞癌细胞 人 √
CALU-1 人肺癌细胞 人 √
CALU-3 人肺腺癌细胞(胸水) 人 √
CCD-1095SK 人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞 人 √
CCRF-CEM 人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞 人 √
CEM/C1 人急性淋巴细胞白血病细胞 人 √
CFPAC-1 人胰腺癌细胞 人 √
CNE1 人鼻咽癌细胞 人 √
CNE2 人鼻咽癌细胞 人 √
COLO 205 人结肠癌细胞 人 √
COLO 320DM 人结直肠腺癌细胞 人 √
CW-2 人结肠腺癌细胞 人 √
DAOY Daoy细胞,具体不清楚 人 √
DAUDI 人Burkitt's淋巴瘤细胞 人 √
DETROIT 562 人咽头癌胸水转移细胞 人 √
DLD-1 人结直肠腺癌上皮细胞 人 √
DU 145 人前列腺癌细胞 人 √
EA.HY926 人脐静脉细胞融合细胞 人 √
ECV304 人脐静脉内皮细胞 人 √
ES-2 人卵巢透明细胞癌细胞 人 √
FADU 人咽鳞癌细胞 人 √
FTC-133 人滤泡性甲状腺癌细胞 人 √
GBC-SD 人胆囊癌细胞 人 √
GCIY 人 √
H1299 人非小细胞肺癌细胞 人 √
H1395 人肺腺癌细胞 人 √
H1650 人非小细胞肺癌细胞 人 √
H1703 人肺鳞癌细胞 人 √
H1755 人肺癌细胞 人 √
H1944 人非小细胞肺癌细胞 人 √
H1975 人肺腺癌细胞 人 √
H2170 人肺鳞癌细胞 人 √
H226 人肺鳞癌细胞 人 √
H292 人肺癌细胞(淋巴结转移) 人 √
H358 人非小细胞肺癌细胞 人 √
H460 人大细胞肺癌细胞 人 √
H520 人肺鳞癌细胞 人 √
H596 人肺腺鳞癌细胞 人 √
H661 人大细胞肺癌细胞 人 √
H716 人结直肠腺癌细胞 人 √
H838 人非小细胞肺癌细胞 人 √
Hacat 人永生化角质形成细胞 人 √
HBE 人支气管上皮样细胞 人 √
HBL-100 人整合SV40基因的乳腺上皮细胞 人 √
HCC1937 人乳腺癌细胞 人 √
HCC827 人非小细胞肺癌细胞 人 √
HCCC-9810 人胆管细胞型肝癌细胞 人 √
HCCLM3 人高转移肝癌细胞 人 √
HCT-116 人结肠癌细胞 人 √
HCT-8 人回盲肠癌细胞 人 √
HEC-1-A 人子宫内膜腺癌细胞 人 √
HEC-1-B 人子宫内膜腺癌细胞 人 √
HEK-293 人胚肾细胞 人 √
HEL 人红白细胞白血病细胞 人 √
HELA229 人宫颈癌复苏细胞 人 √
Hela-J 人 √
Hep G2 人肝癌细胞 人 √
HEP-2 人喉表皮样癌细胞 人 √
HEP3B 人肝癌细胞 人 √
HEY 人卵巢癌细胞 人 √
HFF 人包皮成纤维细胞 人 √
HFL1 人胚肺成纤维细胞 人 √
HFOB1.19 人SV40转染成骨细胞 人 √
HGC-27 人胃癌细胞(未分化) 人 √
HK-2 人肾皮质近曲小管上皮细胞 人 √
HL-60 人原髓细胞白血病细胞 人 √
HMEC-1 人微血管内皮细胞 人 √
HO-8910 人卵巢癌细胞 人 √
HPN1 人 √
HS683 细胞人脑视神经胶质瘤细胞 人 √
Hs888Lu 人肺成纤维细胞 人 √
HT-1080 人纤维肉瘤细胞 人 √
HT-29 人结肠癌细胞 人 √
HT-3 人 √
HTR8 人滋养细胞 人 √
HUCCT1 胆管上皮癌细胞 人 √
HuH-6 人肝母细胞瘤细胞 人 √
HUH-7 人肝癌细胞 人 √
HUT78 人T淋巴细胞白血病细胞 人 √
HUVEC-C 人脐静脉内皮细胞 人 √
ISK 人 √
JAR 人 √
JEG-3 人 √
JEKO-1 人 √
Jurkat,Clone E6-1 人 √
K-562 人 √
KATO III 人 √
KLE 人 √
KTC-1 人 √
KU812 人 √
KYSE-150 人 √
LI-7 人 √
LNcap clone FGC 人 √
L-O2 人 √
LOVO 人 √
LS 174T 人 √
MCF10A 人 √
MCF-7 人 √
MDA-MB-231 人 √
MDA-MB-231(DMEM) 人 √
MDA-MB-231(L-15) 人 √
MDA-MB-436 人 √
MDA-MB-468 人 √
MG-63 人 √
MGC-803 人 √
MIA PaCa-2 人 √
MM.1S 人 √
MNNG/HOS Cl #5 人 √
MRC-5 人 √
MV4-11 人 √
N87 人 √
NCI-H1299 人 √
NCI-H1563 人 √
NCI-H2452 人 √
NCI-H647 人 √
NK-92 人 √
NTHY-ORI-31 人 √
OCM1A 人 √
OS-RC-2 人 √
OVCAR-3 人 √
PANC-1 人 √
PC-3 人 √
PC-3M 人 √
PC-9 人 √
PLC/PRF/5 人 √
Raji 人 √
RBE 人 √
RD 人 √
RKO 人 √
RL95-2 人 √
RT4 人 √
RWPE-1 人 √
SAOS-2 人 √
SH-SY5Y 人 √
SiHa 人 √
SJCRH30 人 √
SK-BR-3 人 √
SK-HEP-1 人 √
SK-MES-1 人 √
SK-N-BE(2) 人 √
SK-NEP-1 人 √
SK-N-SH 人 √
SK-OV-3 人 √
SPC-A-1 人 √
SU-DHL-6 人 √
SV-HUC-1 人 √
SW 1990 人 √
SW1353 √
SW480 人 √
SW579 人 √
SW620 人 √
SW-620 人 √
SW839 人 √
SW982 人 √
T/G HA-VSMC 人 √
T-24 人 √
T47D 人 √
T82 人 √
T84 人 √
TCA-8113 人 √
TE 353.Sk 人 √
TE-1 人 √
THP-1 人 √
TMK1 人 √
TPC-1 人 √
TT 人 √
TTA1 人 √
U-118MG 人 √
U-2 OS 人 √
U251 人 √
U87 人 √
U-87MG 人 √
U-937 人 √
UM-UC-3 人 √
VCAP 人 √
WERI-RB-1 人 √
WI-38 人 √
WISH 人 √
WPMY-1 √
ZR-75-1 人 √
ZR-75-30 人 √