酶标仪的自检和校准从上述所获的酶标仪功能的有关信息材料,底子上可以说是直接的,有了方针今后,若是还想取得对某一酶标仪的感性认识,可以对其进行自检,首要有下述几个方面。
(一)外观
酶标仪上应有仪器称号,类型,编号,出产厂家,出厂日期和电源电压;各调理旋钮,按键和开关均能正常作业,外表面无显着机械损害;显现文字应明白完好。
(二)酶标仪的安稳性(漂移)
选用492nm波长,在吸光度o.0A处,测定标称值为1.0A的光谱中性滤光片(测定操作按仪器阐明进行),记载仪器示值或均值,10min后再次记载仪器示值或均值,前后两次测定值之差不该超越±0.00。
(三)吸光度测定的度
选用405,492和620 nm波长,以空气为参比,别离测定标称值为0.5和1.0A的光谱中性玻璃滤光片,用测验板替代酶标板,按仪器阐明接连测定3次,按下式核算度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:为规范值)。
(四)吸光度测定的重复性
波长挑选同(3),在酶标板排加注空白溶液,第二排参加浓度为200rig/ml的重铬酸钾溶液,重复测定5次。记载每次测定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值与各次对应孔吸光度值。按下式核算重复性:
(五)酶标仪的线性
选用540nm波长,将标称值o.5,1.0A中性滤光片别离放入测验板样本方位中,以空气为参比,各重复测定3次;然后将以上两片中性滤光片叠加后置于测验板的同一孔位中,重复测定3次。线性差错:
式中A1为片中性滤光片吸光度均值,A:为第二片中性滤光片吸光度均值,A1,2为两片中性滤光片叠加后的吸光度均值。
(六)测定速度的检定 .
选用492nm波长,放人96孔酶标板进行测定,用秒表计测仪器打印出悉数数据的时刻。
酶标仪除了在选购时,应尽能够自检外,在运用中也应定时检定,以确保酶标仪测定的有效性。
附:200ttg/ml重铬酸钾溶液的制造
将重铬酸钾固体试剂放人称量瓶中(去盖)置于烘箱中,在105±5℃下烘2h后,置于枯燥器内冷却30min,在剖析天平上称取o.2829g,置于100ml烧杯中,用o.05mol/L稀硫酸溶解后,移入500ml容量瓶中,以少数o.05mol/L稀硫酸洗烧杯3次,洗液并入容量瓶中,用0.05mol/L稀硫酸稀释至刻度线,摇匀。