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2019/5/21 15:38:26细胞冻存液配置
细胞冻存前应该做哪些准备呢?
1.准备适量冻存管,做好标记后置于4℃冰箱预冷;
2.配制冻存液:
一般为80%*培养基+10%FBS+10%DMSO, 需要现配现用
3.程序降温
a.按照细胞传代步骤1-7操作制备细胞悬液并离心;
b.弃去上清,加入适当体积的冻存液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液;
c.将1 ml细胞悬液加入加入之前已做好标记的冻存管中并做好记录;
d.将冻存管放入梯度冻存盒然后保存至-80℃过夜(可以先在4℃冰箱放置30 min,然后转移至-20℃放置1-2 h,后转移至-80℃过夜),第二天取出放入液氮罐,并记录好位置信息。
是不是很繁琐?我们来看一下HAKATA无血清细胞冻存液:
直接从4°C冰箱中取出使用,冻存管放于-80°C过夜,再转移至液氮中。
就是这么简单直接,那么它的效果怎么样呢?
我们来看一组对比
普通冻存液与HAKATA无血清细胞冻存液细胞复苏情况
可见,使用HAKATA无血清细胞冻存液的细胞复苏(存活率和活力)更好
| 普通冻存液 | HAKATA无血清细胞冻存液 |
配置 | 需要现配,配方麻烦 | 取出即用 |
冻存方式 | 程序降温,繁琐耗时 | 无需程序降温,直冻-80°C |
适用性 | 一般培养细胞 | 适合无血清培养细胞和蛋白表达细胞 |
安全性 | 无法把控 | 配方明确,不含动物来源性蛋白 |
存活率 | 冻存后复苏率低 | 细胞(存活率和活力)高达90%-98%,批次差异小 |
HAKATA无血清细胞冻存液,通用于各种动物细胞株(肿瘤细胞和常规细胞),冻存细胞可在-80°C长期保存(>5年)。Cell Freezing Medium配方明确,不含动物来源性蛋白,不含血清,可减少各类细菌、病毒和支原体等污染,保证冻存细胞的安全。该冻存液含DMSO、葡萄糖等各种细胞营养成分,提高细胞存活率和活力,亦适用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞。