实时荧光定量PCR 简介

荧光定量PCR检测技术从诞生到现在已经有 8 年了，但是其应用在近四年才迅猛增长。在 Medline 数据庫中，用“ Taqman” 或 ”real time PCR” 作为关键词检索，在1996 年仅有 19 篇，在 1997 年仅有 28 篇，在 98 、 99 、2000 年分别达到了 52 、 157 、 409 篇， 2003 年已经达到2984 篇，相信在不久的将来会有更多的文章发表。针对实时 PCR 这一热点领域，闪晶公司对它进行了深入细致的研究，并且及时地为广大科研人员推出这项技术服务。

荧光定量PCR基本原理

•  Taqman 技术：该技术以美国 ABI 公司为代表。 PCR 扩增时，在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针。该探针为一直线型的寡核苷酸，两端分别标记一个荧光报告基团和一个荧光淬灭基团，探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收， PCR 仪检测不到荧光信号； PCR 扩增时（在延伸阶段）， Taq 酶的 5'' － 3'' 外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条 DNA 链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与 PCR 产物形成*同步，这也是定量的基础所在。

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ABI公司
Taqman探针的合成标记
Sybr green I荧光染料
荧光定量PCR Taq酶
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荧光定量PCR一步法RT－PCR试剂盒
TrizolRNA提取试剂
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