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2019/8/6 10:03:30搞事情啊,翊圣请来了四位ECL超级魔术师??
老板,都说你家ECL功能强,我给个飞克级的蛋白,能变出条带吗?
办不到??
老板,我多给点小费,把蛋白提高到皮克级,能不能变出条带?
还是办不到??那也太差劲了,还想不想混了!
不,小伙,你理解错了,是通通不是问题!!跟着我往下看!
点亮您的印迹膜,一触即发
ECL试剂,即化学发光法辣根过氧化物酶(HRP)底物,是目前Western blotting检测中为灵敏的试剂。目前市场上普通ECL试剂在使用过程中经常出现易淬灭、高背景、不稳定以及低丰度蛋白难以检测等问题,影响终实验结果。
翊圣生物根据现状,集中免疫检测领域的科研人员,在严格控制鲁米诺原料的基础上,不断改良增强剂和稳定剂配方,针对不同需求开发了4类ECL试剂,包含增强型、超敏型、持久型和zui高灵敏度型产品,不仅可满足实验者对目的蛋白从低丰度到高丰度表达的检测要求,同时可在不影响实验的条件下,提高发光强度,使您获得的图像更加清晰。
魔术师特性技能
的灵敏度——皮克至低飞克级的抗原检测
更高的信噪比——发光底物,降低背景
更利节省抗体——优化底物系统,更高抗体结合力
优异的性价比——更高的性能,更低的价格
特好的稳定性——新型氧化剂,常温下稳定保存1年
ECL魔术师简历
ECL试剂检测的核心原理为氧化反应发光:鲁米诺(lumino)作为发光底物的主要成分,在碱性条件下,通过辣根过氧化酶(HRP)催化,被H2O2氧化生成3-氨基邻苯二酸的激发态中间体,当其回到基态时发出光子,zui大发射波长为425 nm,光子信号可通过X射线胶片或CCD成像仪被捕获。
魔术师的出场由您来选择
翊圣目前拥有的4种ECL产品,各具特色,能够*用户的免疫印迹应用需求。
表1 ECL试剂选择指南
Yeasen | Enhanced ECL 增强型 | Super ECL 超敏型 | SuperDura 持久型 | MaxiSignal zui高灵敏度型 |
适用样本 | 靶点丰度较高,常规蛋白样本 | 靶点丰度低,样本有限 | 靶点丰度较低,样本有限 | 靶点丰度极低,样品珍贵 |
检测灵敏度 | 中等皮克级 | 低皮克级 | 中等飞克级 | 低飞克级 |
信号持续时间 | < 2 h | < 12 h | < 24 h | < 8 h |
适用检测系统 | 所有试剂均适用X射线胶片,CCD成像仪 | |||
一抗稀释浓度 | 1:1000-1:4000 | 1:1000-1:10000 | 1:1000-1:50000 | 1:5000-1:100000 |
二抗稀释浓度 | 1:1000-1:4000 | 1:2000-1:10000 | 1:50,000-1:250,000 | 1:100,000-1:500,000 |
推荐用膜 | NC膜 | NC膜或PVDF膜 | NC膜或PVDF膜 | NC膜或PVDF膜 |
存储稳定性 | 室温1年 | 室温1年 | 室温1年 | 4℃ 1年,室温半年 |
优势 | 同一级别灵敏度中信号zui强 | ,适用于多数WB实验 | 长信号持续时间,极其适用于多次曝光 | 灵敏度,极其适用于痕量蛋白检测 |
【注】:推荐抗体稀释浓度为抗体储液浓度为1 mg/mL时的稀释浓度。
ECL大师履历
Yeasen ECL试剂对比其他品牌同级别产品具有更佳的使用效果。
图1 Yeasen ECL超敏型底物Super与品牌T同级别底物Pico检测效果比对
图2 Yeasen ECLzui高灵敏度型底物MaxiSignal与品牌T同级别底物West Femto检测效果比对
图3 Yeasen ECL持久型底物SuperDura与品牌T同级别底物West Dura检测效果比对
观众好评
好表演,反馈杠杠的!
1) 中国医学科学院药物研究所
图4 Yeasen ECL超敏型底物Super相对品牌M同级别底物Crescendo,检测灵敏度更高
2)上海交通大学医学院
图5 使用Yeasen ECL增强型底物Enhanced检测目的蛋白,获得清晰锐利的条带
巡演
[1] Ren C F, Zhao Y X, Hou C F, et al. Expression of soluble programmed death-1 protein in peripheral blood regulatory T cells and its effects on rheumatoid arthritis progression[J]. Molecular Medicine Reports, 2017, 15(1): 460-466.
[2] Zhu T, Zhao Y, Wu Y, et al. The Staphylococcus epidermidis gdpS regulates biofilm formation independently of its protein-coding function[J]. Microbial Pathogenesis, 2017, 105: 264-271.
出场费用
Yeasen致力于为您提供的产品。
图6 Yeasen ECL产品与其他品牌同级别产品价格比对
戏后观众指南
遇到的问题 | 原因分析 | 推荐解决方法 |
胶片出现反影 | 反应系统中HRP量过多 | 稀释HRP标记物 |
胶片出现棕色或黄色条带 | ||
荧光猝灭 | ||
操作时间过长,膜逐渐干掉 | 避免膜干掉 | |
保鲜膜、显影液或定影液污染 | 养成良好的实验习惯 | |
反应系统中HRP量过少 | 增加HRP标记物 | |
胶片无条带显现或者信号较弱 | 转膜的效率低 | 提高转膜效率,用预染Marker判断。 |
抗原、抗体量少或不匹配 | 增加抗原/抗体量或选择合适抗原/抗体 | |
X光胶片有问题 | 曝光后X光谱全黑(而非透明色),则表明胶片已*曝光,使用新的X光片 | |
显影/定影液有问题 | 可预先曝光一张胶片进行判断,如有问题当换用新的显影/定影液 | |
反应系统中HRP量过多 | 稀释HRP标记物 | |
高背景 | 一抗二抗浓度太高 | 降低抗体浓度,延长封闭时间 |
抗体未清洗干净 | 增加洗膜次数 | |
封闭不* | 优化封闭条件 | |
使用错误的封闭剂 | 使用其他的封闭剂 | |
过度曝光 | 降低曝光时间 | |
抗体特异性差 | 更换抗体 | |
反应系统中HRP量过多 | 稀释HRP标记物 | |
条带有空斑 | 抗原以及二抗的浓度过高 | 稀释样品重新跑胶,也可将混合好的显色液冰浴后,加到膜上即刻快速显色。 |
带型不规则 | 转膜有气泡或甲醇(对于PVDF膜)水化不均匀 | 优化转膜条件。 |
胶片出现斑点 | HRP标记物聚集体 | 0.2μm膜过滤HRP标记物 |
非特异性条带 | 反应系统中HRP量过多 | 稀释HRP标记物 |
SDS引起蛋白非特异性结合 | 实验流程中不使用SDS | |
抗体特异性差 | 更换抗体 | |
封闭不足 | 增加封闭时间或使用其他封闭剂 |
预约信息
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
Super ECL Detection Reagent 化学发光超敏显色试剂盒 | 36208ES60 | 100 mL | 228.00 |
36208ES76 | 500 mL | 828.00 | |
Enhanced ECL Chemiluminescent Substrate Kit 增强型ECL化学发光检测试剂盒 | 36222ES60 | 100 mL | 325.00 |
36222ES76 | 500 mL | 1255.00 | |
SuperSignal SuperDura Extended Duration Substrate 持久性化学发光底物 | 36223ES10 | 10 mL | 267.00 |
36223ES60 | 100 mL | 1557.00 | |
36223ES70 | 200 mL | 2857.00 | |
36223ES76 | 500 mL | 5257.00 | |
SuperSignal MaxiSignal Maximum Sensitivity Substrate zui高灵敏度化学发光底物 | 36224ES10 | 10 mL | 287.00 |
36224ES60 | 100 mL | 1757.00 | |
36224ES70 | 200 mL | 3257.00 | |
36224ES76 | 500 mL | 5857.00 |
其余大师推荐
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
X射线摄影暗盒(小号) | 36243ES35 | 5×7英寸 | 129.00 |
X射线摄影暗盒(中号) | 36243ES58 | 8×10英寸 | 169.00 |
X光片 | 36209ES01 | 1盒(100片) | 223.00 |
Fixing Powder 定影粉 | 36210ES01 | 包 | 23.00 |
Developing Powder 显影粉 | 36211ES01 | 包 | 23.00 |
Primary & Secondary Antibody Diluent for WB WB一抗二抗稀释液 | 36206ES60 | 100 mL | 147.00 |
36206ES76 | 500 mL | 538.00 |