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2019/11/29 12:54:07
三国时代,诸侯争霸,群雄逐鹿
周瑜更是风度翩翩、文武双全,
全江东公瑾女孩的老公,
只可惜,到底诸葛孔明略胜*,
公瑾终饮恨江东。
pDNA的纯化方案已经日渐成熟,
常规方法亦可以满足目前的需求,
奈何,偏偏又冲出一匹黑马,
以“省时、省力、省钱”获得业内人士交口称赞
虽然常规方法还算出色,
但依然不禁让人发出“既生瑜何生亮”之叹。
话说这位洋“孔明”,生于一户洋人家族:
BIA Separations,
更有一个洋气的名字:
BIA•整体柱•pDNA纯化方案
对决:今天小编就带大家来看一场高手之间的
周瑜-常规方法
VS
诸葛孔明-BIA•整体柱•pDNA纯化方案
周瑜-常规方法 | 诸葛亮-BIA整体柱纯化 | 整体柱纯化方案的优势 | |
纯化步骤及流程对比 | |||
步骤 | 三步法 | 两步法 | þ 步骤少 þ 裂解流程更加符合药品的生产标准 þ 纯化后的质粒纯度一样 þ 减少了分子筛的需求 þ 省时、省力、省钱 |
优化的前期处理 | 必须要用中空纤维柱浓缩样品 | 碱裂解法,CaCl2沉淀蛋白质和RNA | |
分子筛:去除RNA,同时将缓冲液置换为疏水柱缓冲液 | |||
第二步 | 疏水柱:分离开环DNA | DEAE离子柱:分离去除RNA,杂蛋白,内毒素等 | |
第三步 | 离子柱:分离杂蛋白,内毒素等 | C4柱:分离开环DNA | |
纯化成本对比 (以200mg小规模为例) | |||
所需耗材 | 10L分子筛 | 80ml套装柱 | þ 总体成本可降低50% þ 规模越大,成本降低越多 þ GMP级别的接头,更符合GMP标准 þ 轻松放大,避免了装填验证带来的烦恼 |
100ml疏水柱 | |||
100ml离子柱 | |||
GMP接头 | 1L以下的层析没有GMP级别的接头,不符合GMP的标准。 | 从8ml开配有GMP级别的接头 | |
纯化效果 (相同的纯化体积,相同的洗脱方法,相同上样体积) | |||
DEAE离子柱纯化的效果,质粒的纯度已经达到90%以上 | 不言而喻 | ||
疏水柱 | 常规疏水柱回收率和纯度不如BIA的C4整体疏水柱 | C4整体疏水柱的回收率和纯度要高于常规疏水柱 |
各位做过pDNA纯化的老铁们,
说句心底话,
全面碾压有木有?
大写的“省时、省力、省钱”有木有?
话不多说,继续上图
BIA 整体柱两步法质粒纯化工艺流程总览
各位做过pDNA纯化的老铁们,
图看懂了吗?
至于常规方法的效率,
是不是配得上
它将近二倍于BIA整体柱纯化方案的价格,
我就说两句话:
一分钱一分货,
三分钱五分货,
五分钱十分货;
BIA的纯化结果已经证明了,
一张整票胜过一把零钱,
一个整体柱搞定一切……
后的后,
要感谢一个人,
那位pNDA纯化大神小哥哥,
无私地贡献出对比数据,
才有了今天精彩的*打架!
请收下小编的膝盖