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美国nanodrop one超微量分光光度计使用方法

美国nanodrop one光度计使用

Nanodrop是实验室中常见的分光光度计。与传统需要比色皿的分光光度计相比，Nanodrop所需样品的体积大大减少，只需要2 μL，同时也大大降低了实验准备以及清洗的时间。这些优势使得科研人员能够在一分钟内检测多个样品。当然如果你有更多的样品，还嫌效率不够高，你可以选择应用Nanodrop 8000系统，它能够同时检测8个样品。

Nanodrop能够在包括紫外及可见光区域在内的光谱范围内检测样品的吸光度信号。在实验开始前，需要在仪器的软件内设置检测样品的种类，包括蛋白质，DNA, RNA等。根据吸光度,能够计算样品的浓度。DNA及RNA 在260 nm处有吸收度，蛋白质在280 nm处有吸收峰值。浓度与吸光度的对应关系见下表。当然表中浓度与吸光度对应关系成立的前提是样品必须具有很高的纯度。样品纯度可以通过A260/280判定，其临界值可参考下表。大家可能注意到，RNA的A260/280比值要比DNA的值高一些，这是因为碱基U的A260/280的比值要比碱基T的A260/280比值更高。

吸光度	样品	样品浓度	高纯度样品标准（A260/280 ）
A₂₆₀ =1	双链DNA	50 μg/ml	<1.8
	单链DNA	33 μg/ml	<1.8
	单链RNA	40 μg/ml	>2.0
A₂₈₀ = 1	蛋白质	1 mg/ml	<0.6

对Nanodrop检测结果产生直接影响的因素就是样品的纯度。A260/280是检测样品纯度的一个指标，但这个参数只衡量了蛋白质与核酸之间相互污染的情况。没有考虑DNA与RNA之间彼此污染以及其他物质污染的情况，比如苯酚在270 nm附近具有较大的吸光值。

因此在利用Nanodrop检测核酸浓度的时候，除了A260/280外，A260/230也是检测样品纯度的一个指标，高纯度DNA和RNA的两个临界值同样是1.8以及2.0。A260/230在2.0-2.2之间是合理的数值。对于纯的核酸，A260/230的值通常大于A260/280的值。核酸提取过程中残留的有机物通常会对检测结果产生影响。如果检测结果显示230nm处具有很大的吸光值，样品很有可能被EDTA，碳水化合物或者硫氰酸胍等物质污染了。

Nanodrop的检测范围。对于核酸来说，Nanodrop的检测浓度范围在2ng-15μg/μL之间。所以当样品的浓度很低时，比如从单个或少量细胞中提取的DNA或RNA，利用Nanodrop来测量浓度可能就不适合了。这时需要考虑其他的核酸定量方法比如荧光染料的方法。

此款符合人体工程学的独立式分光光度计具有高分辨率和触摸屏界面设计，使您离研究目标更进一步。强大的自动调节光程技术有助于准确测量浓缩样品而无需稀释。

Acclaro 样品智能技术

Acclaro 技术可以在提供准确的定量测定的同时，增强用户对样品质量的了解。对污染物的早期鉴别能够避免下游应用的失败，从而节省故障排除的时间。

在数秒内验证样品结果 - 鉴别样品污染物并获得矫正的浓度结果。

通过警报获取信息 – 通过提供相应的技术支持和解决问题向导，从而获得样品质量的即时反馈。

依靠准确结果——采用嵌入式传感器和数字影像分析技术，确保测量完整性。

NanoDrop One/NanoDrop OneC 特点

同时包含基座和比色皿检测模块，以扩展实验灵活性和扩大动态范围。

测量稀释样品，执行动力学实验并获取细菌培养物的光密度测量结果。

比色皿检测模块包括温度控制和搅拌区域。