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液相色谱仪的结构原理与保养

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2020/4/30 10:10:52
  在一些实验或者工业活动中,会利用液相色谱仪进行实验物品中一些成分的检测。那么液相色谱仪的结构是什么,主要利用的什么原理呢?
 
  液相色谱仪运用的原理类型
 
  1、分配柱色谱法
  2、吸附柱色谱法
  3、离子交换柱色谱法
  4、凝胶柱色谱法
 
  液相色谱仪的结构组成
 
  系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。我们主要看看液相色谱仪、进样系统和分类系统三部分。
 
  液相色谱仪
  液相色谱仪的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统,下面将分别叙述其各自的组成与特点。
 
  进样系统
  液相色谱仪一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。
 
  分离系统
  该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10~50cm(需要两根连用时,可在二者之间加一连接管),内径为2~5mm,由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,住内装有直径为5~10μm粒度的固定相(由基质和固定液构成).固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性(如硅胶表面的硅酸基因基本已除去)、多孔性(孔径可达1000?)和比表面积大的特点,加之其表面经过机械涂渍(与气相色谱中固定相的制备一样),或者用化学法偶联各种基因(如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等)或配体的有机化合物。因此,这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性。例如,在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素(PSA)后,就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。
  另外,固定相基质粒小,柱床极易达到均匀、致密状态,极易降低涡流扩散效应。基质粒度小,微孔浅,样品在微孔区内传质短。这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的。根据柱效理论分析,基质粒度小,塔板理论数N就越大。这也进一步证明基质粒度小,会提高分辨率的道理。
  再者,高效液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60C,通过改善传质速度,缩短分析时间,就可增加层析柱的效率。
 
  液相色谱仪的保养
 
  由于很多时候天气潮湿,很容易使检测器精密的光学部件性能受到影响,导致灵敏度下降或波长检验通不过,更严重者:灯电路板、预放大板及CPU板同时被短路击坏。而这类情况在干燥的北方地区则比较少。由此可见,潮湿气候对仪器损害之大。
  在多雨季节到来之前,勿请用户将仪器调整放置在通风条件好,湿度低(<70%)的实验室内。同时,给实验室配备去湿机、空调及通风装置。表面上看,虽然增加了支出,但您的实际回报将大大超出您的支出。

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