白介素试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人IL-6抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的IL-6与固相抗体和检测抗体结合,形成免疫复合物。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素。洗涤后,加入显色底物,避光显色。加入终止液终止反应,在450nm波长测定吸光度值。
白介素试剂盒的使用注意事项:
检试剂盒标签上的有效期。如果超过有效期,请勿使用;
按说明书确定所有试剂齐全(数量、体积);
标本制督要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量分装做备分。短期内无法实验者,注意低温保存;
好所有实验额外所需物品,(比如移液器,试管,清洗器,酶标仪);
安说明书将所用试剂平億至室温,根据检测标本数量确定所需试剂的量;
检试剂盒内每种试剂的贮存条件,保证所有试剤均按照试剂盒内说明书推荐的条件存储;
检不稳定或旾变质的试剂溶液(比如沉淀或变色)。有些试剤,比如标准品稀释液或者检汎稀释液,可能在设计时就含有沉淀物。
所有试剂在滴入酶标板之前,需充分;
而由于沉淀物的特性,在加入酶标板之前,需不停抗拌;
切勿使用不同批号的试剤取代现有试剤或泥合现有试剂;
在泥合或溶解蛋白溶液时,遊泡沫产生;
在实验开始之前,安排好实验流程;
在实验开始之前,清洁工作台。