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重组人促血小板生成素（TPO）
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详细信息
商品属性：
产品名称 | 英文名称 | Human TPO protein | |
规格 | 5 μg/20 μg/100 μg/1 mg | 货号 | EY-01X8678 |
运输条件 | 蓝冰运输 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
背景：
促血小板生成素（TPO）是一种糖蛋白，由肝脏、肾脏、骨髓基质和其他一些组织产生。血液中的 TPO 水平大多与血小板和骨髓巨核细胞的丰度呈负相关，但多种炎症或感染状态、肝功能衰竭和血液学紊乱都会导致该激素的循环水平意外偏高或偏低。
标记：
1.将细胞培养基与EdU溶液按照500：1的比例混合，制成2×EdU标记培养基。
2.提前将2×EdU标记培养基预热，然后将150微升2×EdU标记培养基与等体积细胞培养基混合，获得1×EdU溶液。
【注】：①不建议替换全部培养基，这样可能会影响细胞增殖的速度。②配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜。
3.孵育细胞2 h，弃培养基。
【注】：①培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态。②大多数肿瘤细胞以及粘附细胞系均可采用2 h的孵育时间。
4.以1xPBS清洗细胞两次，每次5 min, 以除去未掺入DNA的EdU残留。
【注】：对于贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。
实验步骤：
1. 将细胞以 104-105 个细胞/孔的密度接种在 96 孔板 中，加入 100μL 培养基，含或不含待测化合物。在 CO2 培养箱中在 37℃ 下培养细胞 24 小时。
2. 向板中加入 10μL 不同浓度的待测物质。
3. 在培养箱中将培养板培养适当时间（如 6、12、24 或 48 小时）。
4. 向板的每个孔中加入 10μL CCK-8 溶液。小心不要将气泡引入孔中。
5. 将平板在培养箱中孵育 1-4 小时。
6. 在读板之前，在定轨振荡器上轻轻混匀。
7. 使用酶标仪测量 450nm 处的吸光度。
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