高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
高效液相色谱仪使用前的准备工作:
1、准备所需的流动相,用合适的0.45μm滤膜过滤,超声脱气20min。
2、根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱(注意方向)和定量环。
3、配制样品和标准溶液(也可在平衡系统时配制),用合适的0.45μm滤膜过滤。
4、检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
高效液相色谱仪的开机操作:
①在开机之前,根据所做样品的方法要求,准备好所用流动相,标样及样品。流动相抽滤后超声脱气15分钟,标样和样品0.45um膜过滤。
②接通电源,依次开启A泵、B泵、柱温箱、自动进样器、检测器、系统控制器,待泵和检测器自检结束后,打开电脑显示器、主机,启动工作站软件。
③泵排空操作:打开LC-20AT泵排空阀(逆时针90度以上),按Purge键,泵开始排空运行。检查流动相入口Teflon管路没有气泡后,再按Purge键停止排空。