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MS培养基使用注意事项,及特点分析方案

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2021/6/21 17:10:29

MS是人名Murashige and Skoog的缩写。MS培养基是MurashigeSkoog1962年为烟草细胞培养设计的,其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,它的硝酸盐含量高,其养分的数量和比例合适,能满足植物细胞的营养和生理需要,因而适用范围比较广,多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。 基于此,这种培养基就用他们的名字来命名了。

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MS培养基是目前使用zui普遍的培养基。其具有较高的无机盐浓度,能够保证组织生长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长。由于配方中的离子浓度高,在配制、贮存和消毒等过程中,即使有些成分略有出入,也不会影响离子间的平衡。MS固体培养基可用于诱导愈伤组织,也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养,其液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显的成功。MS培养基的无机养分的数量和比例比较合适,足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要。因此,一般情况下,不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。和其它培养基的基本成分相比,MS培养基中的硝酸盐、钾和铵的含量高,这是它的显著特点。

 

MS培养基配方表:

MS-1.png

 

注意事项:

 

1.母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水*溶解,然后再将它们混溶,zui后定容到1 L

 

2.母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2ONa2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5.5,zui后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。

 

3.MS培养基中还需要加入24-二氯苯氧乙酸(24-D)、萘乙酸(NAA)苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0 1 mg/mL)。其配制方法是:分别称取这3种物质各10 mg,将24-DNAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/LNaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,zui后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0 1 mg/mL的母液。

 

4.组织培养是否能够获得成功,主要取决于对培养基的选择。不同的培养基具有不同的特点,也就适合于不同的植物种类和接种材料。在开展组织培养项目时,首先要对各种培养基进行了解和分析,以便能从中选择合适的使用。组培用的培养基一般包括基础培养基和激素,但是植物激素的种类和数量,随着不同培养阶段和不同材料有变化,因此各培养基配方中均不列入植物激素。常用的基础培养基除了有MS培养基,还有B5培养基,N6培养基。

 

Caisson MS培养基只含大量元素和微量元素的MS基本培养基(MSP01比较受到欢迎。还有其它含有Gamborg配方维生素的MS培养基(MSP06),以及含有蔗糖的MS培养基(MSP14)和只有微生物的MSP20等,还有其它更多不含磷酸盐、不含氮元素,以及其它含植物生长调节剂的各种MS培养基...

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