CCK8全称Cell Counting Kit-8，是一种基于WST-8（化学名为2-（2-甲氧基-4-硝基苯）-3-（4-硝基苯）-5-（2,4-二磺基苯）-2H-四唑单钠盐）的应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测试剂盒。其工作原理类似于MTT，在电子耦合试剂存在的情况下，WST-8可以被线粒体内的脱氧酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物（formazan）。颜色的深浅与细胞的数量有关。CCK8法在药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性实验、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等方面应用广泛。
注意事项：
1、接种细胞应选对数生长期细胞进行，同时需要选择合适的细胞浓度。
2、检测的时，试剂加入的时候沿着孔壁加入，不要产生气泡，否则会干扰读数。
3、检测OD值范围在0.1-2之间，较为理想的OD值范围为1-2。
4、酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰，可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。
5、为了个人安全，建议穿戴实验服和一次性实验手套操作。
心得体会：
1、同MTT实验一样，96孔板的边缘效应，边孔的水分蒸发很快，培养液及里面的药物会出现浓缩现象，这样会导致数据的误差较大，因此在实验设置的时候，一般将边孔留出为空白孔，在孔中加入液体，以使中间孔的水分饱和。
2、悬浮细胞由于染色困难，一般需要增加细胞数量和延长CCK8孵育时间。
3、CCK8试剂保存时间，0-5℃下保存6个月，-20℃下避光保存1年。
4、金属对实验结果有影响，实验中应想法将其去除。
