PicoGreen双链DNA荧光定量测定试剂盒产品技术说明书

PicoGreen双链DNA荧光定量测定试剂盒产品说明书(简版）

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主要用途

 PicoGreen双链DNA荧光定量测定试剂是一种旨在通过使用PicoGreen荧光染料与样品中双链DNA的高度特异性结合而产生荧光信号来精确定量样品中DNA含量的经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种原核生物和真核生物的细胞或组织DNA以及环境中DNA含量分析。产品严格无菌，即到即用，性能稳定，高度敏感。

技术背景

作为DNA染色剂之一的PicoGreen荧光染料特异性地与样品中双链DNA结合，产生荧光信号。PicoGreen技术可以检测到低达0.5纳克双链DNA的变化。DNA的微量增加引起荧光信号强度（Intensity）或相对荧光单位（RFU）的显著增加。其自发荧光（Autofluorescence）忽略不计，重复性标准差异（Standard Deviation）低，不受样品化学成分的干扰。

产品内容

染色液（Reagent A）                      62.5微升

稀释液（Reagent B）                       15 毫升

标准液（Reagent C）                            1毫升

产品说明书                                 1份

保存方式

保存染色液（Reagent A）和标准液（Reagent C）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，染色液（Reagent A）避免光照，有效保证6月

用户自备

1.5毫升离心管：用于工作液配制的容器

比色皿或96孔板：用于荧光分析的容器

荧光分光光度仪或荧光酶标仪：用于荧光定量分析

实验步骤

一、 测定准备

1． 准备好待测样品，置于冰槽里

2． 设定好荧光分光光度仪（温度为37℃）：激发波长480nm，散发波长530nm，并置零 

3． 实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（Reagent A）置于冰槽里融化。然后移出5毫升稀释液（Reagent B）到新的15毫升离心管，加入25微升染色液（Reagent A），混匀后，用锡纸包裹，标记为染色工作液，放在暗室里。然后进行下列操作。

二、 构建标准曲线

1． 准备好5个1.5毫升离心管，标记为1至5号管

2． 分别加入500微升稀释液（Reagent B）到每个离心管

3． 移取500微升标准液（Reagent C）到1号管，混匀

4． 小心移取500微升1号管稀释的标准液（Reagent C）到2号管，混匀

5． 小心移取500微升2号管稀释的标准液（Reagent C）到3号管，混匀

6． 小心移取500微升3号管稀释的标准液（Reagent C）到4号管，混匀

7． 将1至5号管放进冰槽里备用；标准管含量见下表