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PCR检测试剂盒的特点及其依据的检测步骤

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2021/11/19 21:34:03
   PCR检测试剂盒利用离心柱内硅基质膜提取猪伪狂犬病毒DNA,以此为模板,在特异引物和TaqDNA聚合酶的作用下,经高温变性,低温退火、中温延伸的循环,使特异的DNA的片段拷贝数放大一倍。经过30次循环,使扩增的DNA的片段放大数百万倍。将扩增的DNA的片段进行电泳,经染色后在紫外灯照射下,肉眼可见DNA的片段的扩增带,进而判断待检样本中是否含有猪伪狂犬病毒。
 
  PCR检测试剂盒具有下列特点:
  1.根据DHBV的保守序列设计的引物,与相关病毒无交叉反应。
 
  2.灵敏度比常规PCR高2-3个数量级,可以达到几百拷贝/反应。
 
  3.即开即用,用户只需要提供样品模板,操作简单,定量准确快速。
 
  4.一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
 
  5.足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
 
  PCR检测试剂盒的检测步骤:
  1.核酸提取
  样品进行适当处理后,可采用核酸提取试剂盒,该试剂盒可用于对样本中病毒RNA的提取,请按照说明书进行操作。也可选择其他合适的商品化产品。
 
  2.扩增试剂的准备
  将各试剂按照用量加入无菌离心管中,充分混匀,短暂离心后在PCR反应管中分别加入18μL混合液。
 
  3.加样
  将制备好的样本,阴性对照,阳性对照各取2μL分别加入对应反应管中,加完后盖紧PCR反应管盖,置于PCR仪上。

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