琼脂糖凝胶电泳
脂糖凝胶电泳原理
脂糖凝胶电泳的分析原理与其他支持物电泳最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。
琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小,这就大大提高了分辨能力。现广泛应用于核酸的研究中。核酸会根据pH不同带有不同电荷,在电场中受力大小不同,因此跑的速度不同,根据这个原理可将其分开。
实验步骤
1.制胶:使用电泳缓冲液在制胶器上配制1.0%的琼脂糖凝胶
2.混样:2μL载样缓冲液、 2μL 核酸荧光染料,10μLPCR产物混匀
3.点样:将上步混好的样10 μL加到凝胶孔中
4.电泳:90V电压下电泳10~20min
结果展示
实验周期及交付标准
1. 实验周期:1-2周
2. 交付标准:引物序列、电泳图、原始胶片、实验报告(实验步骤、试剂、仪器)
需确认信息
1、目的基因ID号及种属
2、样本类型(组织or细胞等)
3、样本数量