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小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1elisa试剂盒操作步骤

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2022/2/24 14:32:08

小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)elisa试剂盒操作步骤:


1.         标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在、第二孔中分别加标准品100μl,然后在、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。


2.         加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。


3.         温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。


4.         配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。


5.         洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。


6.         加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。


7.         温育:操作同3。


8.         洗涤:操作同5。


9.         显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.


10.     终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。


11.     测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

ANKRD9锚蛋白重复结构域蛋白9抗体

ANKS1A锚蛋白重复及SAM结构域蛋白1A抗体

APM2脂肪特定转录因子2抗体

APOL3载脂蛋白L3抗体

ARMC3 (Cancer/testis antigen 81)肿瘤/睾丸抗原81抗体

ATXN7L2共济失调蛋白7样2抗体

ARSA芳香基硫酸酯酶1抗体

ATE1精氨酸tRNA的蛋白转移酶1抗体

ATXN7L1共济失调蛋白7样1抗体

AUTS2孤独症易感基因2蛋白抗体(自闭症相关蛋白1)

ATX2脊髓小脑共济失调2型蛋白抗体

ARSH芳香基硫酸酯酶H抗体

ACF1溴区结构域相邻锌指蛋白1A抗体

Apo-1载脂蛋白1抗体

Amisyn突触融合结合蛋白6抗体

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AKD1腺苷酸激酶结构域蛋白1抗体

ABCA7三磷酸腺苷结合盒转运蛋白7抗体

phospho-Na+/K+-ATPase Alpha1(Ser 943)磷酸化钠钾ATP酶α1多肽抗体

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