组织培养技术是在人为创造的无菌条件下将生物的离体器官（如根、茎、叶、茎段、原生质体）、组织或细胞置于培养基内，并放在适宜的环境中，进行连续培养以获得细胞、组织或个体的技术。这种技术已广泛应用于农业和生物、医药的研究。
体内组织细胞在体外培养时，所需培养环境基本相似，但由于物种、个体遗传背 景及所处发育阶段等的不同，各自要求条件有一定差别，所采取的培养技术措施 亦不尽相同，现介绍主要组织细胞培养的要点如下：
上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分，又由于癌起源于上皮组织
内皮细胞
1、产后新鲜脐带，无菌剪取 10—15 厘米长一段，如不能立即培养，可于12小时内保存于 4℃。
2、用三通注射器吸取温 PBS 液注入脐静脉中洗去残血，在入口处用线绳扎紧， 以防液体返流。
3、用血管钳夹紧脐带一端，从另一端向脐静脉中徐徐注入浓度为 0.1%的粗制胶原酶，充满血管，消化 3—10 分钟；注入口用线绳扎，以防液体返流。
4、吸出含有内皮细胞的消化液，于离心管
5、离心去上清，加入RPMI1640培养液制成细胞悬液，接种入培养器皿中，置温箱培养。两至三天可见细胞长成单层。
神经细胞（神经元）不易培养，只有在适宜情况下，如接种在胶原底层上，或加入神经生长因子和胶质细胞因子
一．设备：无菌操作设备。
二．大型设备
CO2培养箱：恒温5%、10%CO2维持培养液中pH值。
倒置显微镜：用于每天观察贴壁细胞
解剖显微镜：用于准确地取材。
常温冰箱：-4℃，用于保存各种培养液，解剖液和鼠尾胶。
低温冰箱：-20℃--80℃，用于储存血清酶，贵重物品和试剂。
电热干烤箱：用于消毒玻璃器皿。高压消毒锅：用于消毒培养皿，手术器械。
过滤器：配制解剖液、培养液，必须过滤后才可使用，以去除细菌。
渗透压仪：pH剂，天平等。
三．培养器皿及手术器械
1.培养皿：常用35mm塑料及玻璃皿，解剖取材用15mm-90mm直径。
2.培养板：24-40孔，可用于开放培养。
3.培养瓶；
4.吸管：常用1，5，10mL，均需泡酸、洗涤、灭菌后方可使用。
5.各类培养液贮存器。
6.小型手术器械。
准备
一.配制培养液
（1）解剖液：以无机盐（去除Ca2+, Mg2+ ）加葡萄糖配制成PBS缓冲液，保持一定的渗透压和pH值。
（2）基础培养基（MEM）：主要为多种氨基酸，加入葡萄糖，双蒸馏水溶解。
（3）接种培养液：用于胰酶消化后的细胞分散，做成细胞悬液
（4）维持培养液：接种后24h，全部换成此液，后每2周换一次，每次换1/2。其成分为MEM中含5%马血清，1%谷氨酰胺，及适量的支持性营养物质。
二.培养基质
常用鼠尾胶、小牛皮胶，多聚赖氨酸，再涂胶。
三.消毒培养皿的备用
所有培养器皿均需清水冲洗2-3d，达两次ddH2O，每遍洗刷3-4次，加塞包装，置于烤箱中干燥消毒，于培养前1天进行。
神经细胞分散培养
（一）选材
常用胚胎动物或新生鼠神经组织。鸡胚常用胚龄6-8d，新生鼠或胎鼠（12-14d）或人胚胎。不过也有认为与组织相关。如大白鼠胚胎以19d为宜，小鼠以18d为宜，大鼠纹状体以10d为宜；若纹状体与黑质联合培养的大鼠胚，则黑质以13d，纹状体18-21d为宜；小脑以20-21d小鼠胚胎，所获蒲氏细胞成活率高，颗粒细胞
（二）取材
脑则取出相应组织，在解剖液中先剪碎，以使胰酶消化。脊髓则固定于琼脂板上，用小刀将其要成背腹两侧，分别培养。
（三）细胞分离与接种
神经组织用0.125-0.25%胰蛋白酶在37℃孵育30min，移入接种液，停止消化，并洗去胰蛋白酶液，用细口吸管吹打细胞悬液，使其充分分散，如此多次，待沉淀后吸出上层细胞悬液，计数，预置细胞密度，接种于培养皿（1×106），做电生理应为5×105或更低。
（四）抑制胶质细胞生长
培养3-5d后，也有人认为培养7d后，用阿糖胞苷
