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2022/5/3 10:59:21浅谈流式细胞计数仪验证和校准怎么做?
流式细胞仪在生物药厂里面,不论计量校准还是验证,都是科研和QC工作者头疼的问题;
问题1:买了很多年了,验证会不会通不过,计量会不会通不过
问题2:做一次计量动辄5200以上的成本。
问题3:验证很多第三方不会做,厂家做一次太贵了。
那怎么解决这些流式细胞仪验证和校准问题呢?
流式细胞仪的测量原理:流式细胞计可同时进行多参数测量,信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号。测量是在测量区进行的,所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点。液流中央的单个细胞通过测量区时,受到激光照射,这些生物学参数又和细胞对光线的反射、折射等光学特性有关。未遭受任何损坏的细胞对光线都具有特征性的散射,因此可利用不同的散射光信号对不经染色活细胞进行分析和分选。经过固定的和染色处理的细胞由于光学性质的改变,其散射光信号当然不同于活细胞。
一、那么流式细胞仪计量校准包括哪些内容呢?
1、 分辨力
2、 线性相关系数
3、 检出限
4、 漂移
5、 重复性
6、 示值误差
二、标准物质准备
1、荧光微球,单一荧光强度
2、多重荧光强度混合荧光微球标准品
3、计数荧光微球
4、淋巴细胞计数标准物质
校准时标准物质不确定度不超过20%(K=2)
注:流式细胞仪复校间隔建议一般不超过1年;
三、流式细胞仪验证
验证一般在药厂都是源自自己的工艺,校准也是验证的一部分,下面来看,其实验证和校准有很多重合的地方。流式细胞仪的性能评估,是评定仪器能否胜任高复杂性流式应用的检测标准。根据流式细胞仪的性能评估标准,对流式细胞仪的以下指标进行了评估:
1、检测灵敏度;
2、动态范围;
3、群体分辨能力;
4、线性度;
5、稳定性;
6、可重复性;
7、对微颗粒的检测能力;
下面来看部分检测结果:
每日质控微球rCV统计
八峰彩虹微球在流式细胞仪上的检测结果
对不同大小的微球检测结果
以上就是我们关于流式细胞仪验证大概的所做的内容,去测试流式细胞仪的稳定性、重复性、灵敏度高,从而去验证仪器的性能。
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如下是在校准结果报告中体现的表格,供用户去参考。
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