DNA聚合酶是PCR反应中*组成部分,是参与DNA复制中的重要酶,被用在生物及医学等领域的各个研究方向上。PCR技术发明至今40多年的时间里,从早期被发现的Taq DNA聚合酶到现在,酶越来越多样化。随着新酶的发现和对旧酶的改造,DNA聚合酶的保真性、特异性、灵敏度等都获得了明显的改进。而高保真DNA聚合酶的出现正是顺应了市场需求,下面小编将围绕高保真DNA聚合酶的作用原理和应用方向等进行介绍。
一、什么是什么是高保真酶
高保真DNA聚合酶有聚合中心和酶切中心,聚合中心具有5'→3'的DNA聚合酶活性,可沿5'→3'方向催化合成DNA;酶切中心具有3'→5'外切酶活性,可以进行碱基错配的修复。常见的高保真DNA聚合酶类型有Pfu、KOD等。
二、如何选择高保真酶
对于测序、基因功能研究、蛋白表达、定点突变等,高保真性的扩增是非常重要的,可以确保各种扩增子的可靠扩增。以测序文库扩增过程为例,测序过程中的突变会给序列拼接造成困难,甚至会干扰某些需要低频检测的分析结果。对于市场上琳琅满目的各种高保真DNA聚合酶,选择一款合适的酶产品是极为必要的。市面上常见的高保真酶特性主要包含保真度、扩增速率、特异性、是否耐U等。