人β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)酶联免疫检测试剂盒简介-化工仪器网-手机版

用途：用于人血清、血浆及相关液体样本中β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)测定。

工作原理

本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定样品中人β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)水平。向预先包被了人β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)单克隆抗体的酶标孔中加入人β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)，温育；温育后，加入生物素标记的抗β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)抗体。再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中人β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)的浓度呈正相关。

试剂盒组成

试剂盒组成	48孔配置	96孔配置	保存
说明书	1份	1份
封板膜	2片（48）	2片（96）
密封袋	1个	1个
酶标包被板	1×48	1×96	2-8℃保存
标准品8000 pg/ml	0.5ml×1瓶	0.5ml×1瓶	2-8℃保存
标准品稀释液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃保存
链霉亲和素-HRP	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
生物素标记的抗β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)抗体	0.5ml×1瓶	1 ml×1瓶	2-8℃保存
显色剂A液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
显色剂B液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
终止液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃保存
浓缩洗涤液	（20ml×20倍）×1瓶	（20ml×30倍）×1瓶	2-8℃保存

需要而未提供的试剂和器材

1． 37℃恒温箱。

2．标准规格酶标仪。

3．精密移液器及一次性吸头

4．蒸馏水，

5．一次性试管

6．吸水纸

注意事项

1．从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差

3．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

4．为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

5．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

6．底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

洗板方法

手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。

自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中

标本要求

1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

操作程序

1. 标准品的稀释：(本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。)

4000 pg/ml	5号标准品	120μl的原倍标准品加入120μl标准品稀释液
2000 pg/ml	4号标准品	120μl的5号标准品加入120μl标准品稀释液
1000pg/ml	3号标准品	120μl的4号标准品加入120μl标准品稀释液
500pg/ml	2号标准品	120μl的3号标准品加入120μl标准品稀释液
250pg/ml	1号标准品	120μl的2号标准品加入120μl标准品稀释液

2. 根据代测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3. 加样：1）空白孔，空白对照孔不加样品，生物素标记的抗β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)抗体，链霉亲和素-HRP，只加显色剂A&B和终止液，其余各步操作相同；2）标准品孔：加入标准品50ul，链霉亲和素-HRP50ul(标准品中已事先整合好生物素抗体，故不加)；3）代测样品孔：加入样本40ul，然后各加入抗β淀粉样蛋白1-40 (Aβ1-40)抗体10ul、链霉亲和素-HRP50ul，盖上封板膜，轻轻震荡混匀，37℃温育60分钟。