手性柱是用来分析或制备手性化合物的色谱柱，也同样分正相和反相，然后根据填料不同可以分为环糊精手性柱、纤维素衍生物手性柱、蛋白类手性柱、配体交换手性柱等多种类型。
手性柱通过引入手性环境使对映异构体间呈现物理特征的差异，从而达到光学异构体拆分的目的。要实现手性识别，手性化合物分子与手性固定相之间至少存在三种相互作用。这种相互作用包括氢键、偶级-偶级作用、π-π作用、静电作用、疏水作用或空间作用。手性分离效果是多种相互作用共同作用的结果。这些相互作用通过影响包埋复合物的形成，特殊位点与分析物的键合等而改变手性分离结果。由于这种作用力较微弱，因此需要仔细调节、优化流动相和温度以达到良好的分离效果。
在使用时应注意：
1、流动相中任何时候不能含有无机酸，无机碱，不可用不含铜离子的盐，否则将损坏设备。
2、流动相一定要采用预混合方式走等度，在线混合方式将损坏设备。样品一定要用水或流动相溶解。
3、避免在pH低于4.0或高于7.0的条件下使用。
