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蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒的试剂组成和配制

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2023/6/30 9:20:53
SP(EC2.4.1.7) 要存在于微生物和植物中,裂解葡萄糖苷键,催化葡萄糖基转移到果糖 木糖半乳糖和鼠李糖等,合成相应的葡萄糖基聚糖外,SP还能催化氢/醌合成熊果苷,具有美白效果,在化妆品工业中具有重要应用。
SP能够以磷酸体,催化蔗糖产生1-磷酸葡萄糖,在葡萄糖磷酸酶催化6-磷酸葡萄糖,在 6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用还原NADP+生成NADPH,导340nm光吸收值增测定340nm吸光度增 速率,即可算SP活性。
试剂组成和配制:                                                               
提液液体100mL×1瓶,4℃保存                                                 
缓冲液液体10mL×1瓶,4℃保存                                                   
试剂一液体5mL×1瓶,4℃保存                                               
试剂二液体1.5mL×1支,4℃保存                                                 
试剂液体1mL×1支,4℃保存                                               
试剂四粉剂1支,-20℃避光保存,临用前1mL蒸水溶解                           
试剂五粉剂1支,-20℃避光保存,临用前1mL蒸水溶解                           
试剂粉剂1支,-20℃避光保存,临用前2mL蒸水溶解                           
试剂七粉剂1支,-20℃避光保存,临用前2mL蒸水溶解   
粗酶液提取:                                                                   
1、组按照组质g提液体(mL) 15~10的比例建议约0.1g组,入1mL提液进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃,离心10min,清测
2、菌真菌按照胞数104个提液体mL500~10001的比例建议500万胞入1mL提液,冰浴超声波破碎胞率300w,超声3,间隔7,总时间3min然后10000g,4℃,离心10min,清置于冰测       

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