蛋白质是人体细胞中必要的组成部分,因此人类对于食物中蛋白质的摄取是非常重要的,关系到人类的生命活动。那么换句话来说,测定食物中蛋白质的含量,也是尤为必要的一件事情,随着仪器产品的发展,现在我们在进行蛋白质测定的时候都是采用专业的凯氏定氮仪。经过多次的试验表明,凯氏定氮仪能够避开手工方法的缺点,其测定结果符合国际标准,而且测量速度快、稳定,因此是值得推荐的检测蛋白质含量的设备。
但还需要注意的是蛋白检测的前处理消化步骤也很关键,这就需要用到智能消化炉,所以为了保证测定结果的准确性,在使用定氮仪测定蛋白质含量的时候,有以下几个方面需要注意:
1.消化时间要掌握好,时间过长会引起氨的损失;消化时间不够,消化不完全也会导致总氮量偏低。一般保险起见,从文火开始消化到420℃保温,需要2h左右的时间。
2.样品放入消化管内时,不要沾附颈上,若沾附时可用少量水冲下,以免被检样消化不完全,结果偏低。
3.硫酸钾与硫酸用量的比值是消化成功的关键,它决定酸的沸点,也决定消化所需的时间。添加硫酸钾可以提高温度加快有机物分解,但硫酸钾量过大,沸点太高,生成的硫酸氢铵就分解放出氨,使氮损失。因此当硫酸过多的被消耗或样品中脂肪含量过高时,要增加硫酸的量。
4.消化时,若样品含糖高或含脂较多时,注意控制加热温度,可加入少量正辛醇或液体石蜡,或消泡剂减少泡沫产生。
5.消化时若样品不易消化至澄清透明,可将消化管中溶液冷却,加入数滴过氧化氢后,再继续加热消化至完全。
6.定氮仪使用前可先空蒸一段时间,以除去管道内可能残留的氨,减少误差。
7.消化时热源的强度同迅速消化和完全氨化关系很大,在整个消化过程中,不要直接用强火,保持和缓的沸腾,以文火慢慢升温,以免附在壁上的蛋白质在无硫酸存在的情况下,使氮有损失。
8.将消化后的样品管放入蒸馏室时,为避免蒸馏过程中溶液沸腾时溢出造成氨损失,在将消化管至密封圈时用手轻旋一下消化管,使与密封圈接触更加密闭。
9.定氮仪加碱管路使用前要用氢氧化钠溶液冲洗,使用后要及时用蒸馏水反复冲洗,不能长期积有碱液,以免放置后管路堵塞。
对于还是使用凯氏定氮仪的企业而言,以上的注意事项还是很有参考价值的。