重组蛋白(recombinant protein)是指应用重组 DNA 或重组 RNA 技术而获得的蛋白质。重组蛋白工程先应用基因克隆或化学合成技术获得目的基因(gene of interest,GOI),连接到适合的表达载体,导入到特定的宿主细胞,利用宿主细胞的遗传系统,表达出有功能的蛋白质分子。
重组蛋白的产生是应用了重组DNA或重组RNA的技术从而获得的蛋白质。体外重组蛋白的生产主要包括四大系统:原核蛋白表达,哺乳动物细胞蛋白表达,酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。生产的蛋白在活性和应用方法方面均有所不同。根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统,提高表达成功率。
重组蛋白技术实现了人工控制和操纵生物体的基因表达与蛋白质生产的过程。主要特点如下:
1.设计与产生人工合成或改造的DNA序列,编码 researcher 想要的蛋白质。
2.构建表达载体,将设计的DNA序列插入到可在某宿主细胞中表达的载体上。
3.将构建的表达载体转化或转染入宿主细胞,利用宿主转录翻译系统表达重组蛋白质。
4.从宿主细胞或培养上清中提取和纯化重组蛋白质。
5.对重组蛋白质的结构与功能进行鉴定,实现其生产与应用。
6.可以实现大规模生产和商业化生产重组治疗性蛋白质。
7.可以实现蛋白质的定向进化与改造设计。
8.实现重要蛋白质的高效生产,有助于相关基础与应用研究。