医学硬组织切片成套制备方案

1、新鲜硬组织取材固定(以牙齿为例):
根据材料尺寸/性质,通过切割机获得所需样本,再使用4%多聚甲醛或10%福尔马林溶液固定至少24小时;

2、脱水浸润:

酒精上行脱水:无水乙醇:7200=1:1; 
无水乙醇:7200=3:7;  7200原液I、II;

3、样本包埋

光聚合法包埋:7200原液+固体包埋颗粒(12小时);配合真空冷镶嵌机进行抽真空,放置模具自动灌胶,去除气泡,修复包埋样本

CXQ-2500真空冷镶嵌机

4、粘接样本块至载玻片

采用T4000树脂粘接,并注意液体比例,配合压合台确保粘样均匀

5、切割出目的切面

利用真空吸盘固定,采用切割机对包埋块进行切割,使其暴露出目的切面

6、目的切面打磨抛光

通过真空吸盘固定包埋块,配合磨片机对目的切面进行打磨抛光

7、粘接平行平面

利用光固化技术,配合压片装置将平行载片添加到已经过抛光处理的目的切面

8、切割获得组织切片(厚)

使用切割机及真空吸盘再次对载片进行分离切割,此处可获得厚度约100微米的(厚)切片

9、磨片至所需厚度

使用磨片机对(厚)切片进行最终磨片,使用砂纸作为介质,实时检测磨削量,得到最终的薄片(<10μm)

10、染色封片

HE染色、甲苯胺蓝染色、Ladewig染色法等对切片进行染色,中性树胶封片

11、组织切片显微观察

可使用生物显微镜进行显微图像采集拍照