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2024/1/17 15:43:29我们深知每个项目背后的特别需求和挑战,因此致力于提供高品质定制化的科研服务,满足您个性化的科研需求。
Absin可以提供全面的定制服务包括:
大分子定制: 多肽/蛋白/抗体定制;线性/环状mRNA定制;
类器官技术: 类器官定制服务;类器官技术培训班;类器官平台搭建服务;
免疫学服务: ELISA检测服务;多重荧光免疫组化服务;
其他定制与服务:化合物/酶/抗体/蛋白标记服务;抗体/蛋白纯化服务;血清定制等。
定制案例一:用于WB/IP/IHC/FC/ELISA等实验的多抗制备
1、抗原设计
1)客户提供正确的NCBI号或蛋白序列;
2)技术工程师进行抗原设计。
图1 抗原性质分析图
2、抗原制备
原核表达可溶蛋白/化学合成抗原多肽。
3、抗体制备
1)动物免疫:每个抗原免疫2只兔子;
2)抗体纯化:动物处死,取血;抗原亲和纯化抗体;
3)抗体验证:ELISA验证。
4、数据准备和发货
1)数据:抗体制备流程及数据、抗体说明书、可溶蛋白SDS-PEAG/多肽合成的HPLC和MS报告;
2)发货:抗原亲和纯化抗体(大于5mg);若客户需要可提供抗原蛋白0.5mg/目的多肽。
定制案例二:化合物/酶/抗体/蛋白标记服务
Absin可以提供多种常见荧光素标记服务,体系成熟,目前常规染料标记周期1-2周。需要注意的是标记会产生损耗,量越小的情况损耗越大,为尽量减少损耗,我们建议您至少100ug起标。
化合物标记流程:
图2
我们会根据化合物的结构给出相应的标记建议:
如生物素标记七叶皂苷A:
图3
标记建议:
生物素可以合成在该结构的羟基上,但是由于多个羟基活性近似,所以会出现多个羟基被结合上生物素的情况。最终合成产物不单一,需要老师确定这种不可避免的情况能否满足实验需求。
定制案例三:蛋白表达及纯化服务
客户提供模板或全基因合成基因模板,经过跨膜区预测、抗原性质分析、可能的蛋白结构预测后给出蛋白表达建议。
图4 可能的蛋白结构预测
评估蛋白整体性质,若蛋白整体性质较好,则可以进行纯化流程:
1、扩增克隆到原核可溶表达载体中,测序;
2、小试表达测试,SDS-PAGE;
3、如有表达,进行大规模表达;
4、蛋白纯化,SDS-PAGE;
5、透析,SDS-PAGE,保存。
抗体定制常见问题解答
Q1:如何确定选择单抗还是多抗定制?
A1:单抗是一个B细胞克隆产生的针对一种抗原表位的的单一抗体;多抗是多个B细胞克隆产生的针对多种抗原表位的多种抗体混合物。对抗体特异性要求高,用量较大,需要长期使用一致的抗体,一般选择单抗(如WB/IP/IF/ICC等)。对抗体的特异性要求不高,需要做沉淀和凝集反应的检测性实验或者只需做ELISA检测,一般选择多抗。
Q2:定制的抗体没有找到参考文献,有推荐的使用浓度吗?
A2:我们一般推荐先用1:1000做预实验,根据预实验结果,调整抗体使用浓度。另外,即使有参考文献,由于实验设备、操作体系等因素的影响可能会有所差异,建议老师结合自己的实验做下测试,以达到最佳的实验使用效果。
Q3:小鼠腹水得到的抗体和小鼠血清有交叉反应正常吗?纯化后是否可以解决这个问题?
A3:从小鼠腹水中得到的抗体肯定会对小鼠血清有亲和性,出现交叉反应属于正常现象。可以通过抗原亲和纯化得到特异性的抗体,能够较好改善交叉反应的现象。但由于纯化效率不可能达到100%,因此不能保证消除。
好消息!Absin文献奖励重磅升级!
Absin特色产品线:
WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;激动剂/抑制剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒;呼吸爆发试剂盒;ELISA试剂盒;重组蛋白;抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体;定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...
Recombinant Mouse TGF-β1 Protein
Goat anti-Rat IgG-HRP Antibody
Rabbit anti-IL-1β Polyclonal Antibody