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2024/3/20 11:53:26Elabscience谷丙转氨酶(ALT/GPT)活性荧光法测试盒适用于检测动物组织样本及血清(浆)等液体样本中的谷丙转氨酶活性。
谷丙转氨酶(ALT)能够催化丙氨酸和α-酮戊二酸发生转氨基反应,生成丙酮酸和谷氨酸。丙酮酸在丙酮酸氧化酶的作用下生成H2O2,在过氧化物酶作用下,将无荧光探针氧化为有荧光的物质,通过测定体系荧光值的增加量,即可计算出 ALT的活性。
试剂准备
① 检测前,所有试剂需平衡至室温。
② 试剂三工作液的配制:
每支试剂三粉剂用1.2 mL试剂一充分溶解,置于冰盒上待用,可-20°C保存7天。
③ 1 mmol/L丙酮酸标准品储备液的配制:
取10μL试剂五加入到990μL试剂一中,配制成1 mmol/L的丙酮酸标准品储备液,临用前现配现用。
④ 50μmol/L丙酮酸标准品溶液的配制:
按照1 mmol/L丙酮酸标准品储配液:试剂一体积比为1:19的比例稀释20倍,即得50μmol/L标准品溶液,按需配制,置于冰盒上待用。
⑤ 反应工作液的配制:
按试剂一:试剂二:试剂三工作液:试剂四体积比为56:4:20:20 的比例混匀,现用现配,避光保存,按需配制。
实验关键点
① 试剂一取用时应倒出部分,再取用,避免试剂污染。
② 样本加入板孔中时应触底加入。
操作步骤
① 标准孔:向酶标板对应的标准孔中加入 20μL 的不同浓度标准品。
测定孔:向酶标板对应的测定孔中加入 20μL 的待测样本。
② 向步骤①各孔中加入 100μL 的反应工作液。
③ 酶标仪上振板 5 s,室温静置 3 min,荧光酶标仪上设置激发光波长 535 nm,发射光波长 587 nm,测定各孔荧光值,记为 F1,然后于室温下避光静置反应 60 min,相同波长条件下测定各孔荧光值,记为 F2,则△F = F2 - F1。
注:标准孔不需要求差值,直接取反应 60 min 后测定的荧光值做标准曲线即可
产品选购:
货号 | 产品名称 | 规格 |
E-BC-F038 | 谷丙转氨酶(ALT/GPT)活性荧光法测试盒 | 48T(32 samples) |
96T(80 samples) |