技术文章

abcam抗体保存指南

上海嵘崴达实业有限公司

2012/2/22 16:50:09

                                                             abcam抗体保存指南

保存温度和条件

对于我们的很多抗体而言,分装成小等份并冻存于 -20oC 或 -80oC 是*保存条件。分装成小等份可zui大程度减少由冻融造成的损伤,以及从单个试剂瓶中多次吸取而引入的污染。小等份只需冻融一次,如有剩余,可将剩余物保存于 4oC. 在收到抗体时,在 10,000 × g 下离心 20 秒以沉积截留于试剂瓶螺纹的溶液,并以小等份转移至低蛋白结合微量离心管中。小等份的量取决于实验人员在实验中通常采用的量。小等份应不小于10 µl; 等份越小,储液浓度因抗体蒸发及吸附于保存瓶表面而受到的影响越大。
在大多数情况下,收到抗体时在 4oC 下保存一至两周,然后再冷冻进行长期保存是可接受的,但也许腹水液是例外,它可能包含蛋白酶,因而应该尽快冻存。同样,遵照数据表上的建议是重要的。
免责条款和其它特别条件:
 
用*防止污染
 
为了防止微生物污染,可将*加入抗体制备品中达到0.02% (w/v). 的终浓度。很多 Abcam 抗体已经包含这种防腐剂抗体已经包含这种防腐剂,所用浓度范围为 0.02 至 0.05%。这会标示在数据表上标题为“保存缓冲液”的栏目。
不使用*的情形:

*可通过透析或凝胶过滤从抗体溶液中除去。IgG 的分子量为 150,000 道尔顿(IgM 为约 600,000);*的分子量为 65 道尔顿。截留分子量为 14,000 道尔顿的微透析装置可保留抗体同时使叠氮化物向外扩散。在保持于 4oC 的磁性搅拌器上的烧杯中,每毫升抗体使用至少一升冷 PBS 并搅拌透析装置 6 小时。更换 PBS 两次,每次更换搅拌至少 6 小时。如有可能,所有材料都应灭菌并且所得的制备物应无菌操作。

 
冷冻/融化损伤
 
重复冷冻/融化循环可使抗体变性,导致其形成使抗体结合能力降低的聚集物。
保存于 -20oC 对于大多数抗体是适当的;保存于 -80oC 无明显优势。冰箱不能为无霜型。 这些冷冻和融化之间的循环(以减少结霜)恰恰是应该避免的。出于相同原因,抗体试剂瓶应置于具有zui小温度波动的冰箱区域,例如朝冰箱后部放置而不是置于门架上。
有些研究人员加入冷冻保护剂甘油达到 50% 的终浓度以防止冷冻/融化损伤;甘油可将凝固点降低至低于 -20oC。虽然这对于很多抗体是可接受的,但是只有一小部分我们提供的抗体测试了在该保存条件下的稳定性,并且我们的保证仅适用于按数据表上推荐的方式保存的抗体。不建议将包含甘油的溶液保存于 -80oC,因为该温度低于甘油的凝固点。请注意甘油可被细菌污染。如果加入甘油或任何冷冻保护剂,则应当小心操作,以得到无菌制备物。
应避免抗体在稀释至工作浓度后在 4℃ 下保存超过一天。蛋白质在高浓度下保存时一般不易降解,理想的浓度为 1 mg/ml 或更高。这是在抗体溶液中加入蛋白质例如 BSA 作为稳定剂的理论基础。加入的蛋白质也有助于减少抗体因结合于容器壁上而造成的损失。对于打算进行偶联的抗体而言,由于稳定蛋白质会与抗体竞争,降低了偶联的效率,所以不应加入稳定蛋白质

 

相关产品

猜你喜欢

当前客户在线交流已关闭
请电话联系他 :