实时荧光定量PCR仪(QuantitativeReal-timePCR,简称qPCR仪)的工作原理基于PCR(聚合酶链式反应)技术,并结合了荧光检测技术,实现了对DNA或RNA模板的实时、定量分析。
在实时荧光定量PCR仪中,首先设计特定的引物和荧光探针,这些引物和探针能够特异性地结合到目标DNA或RNA序列上。然后,将待检测的样本、引物、探针和PCR反应体系混合,放入qPCR仪中进行PCR扩增。
在PCR扩增过程中,qPCR仪会实时监测荧光信号的强度。当探针与目标序列结合后,荧光信号会显著增强,且荧光信号的强度与目标序列的扩增量成正比。因此,通过监测荧光信号的变化,可以实时了解PCR扩增的进程和产物的生成情况。
实时荧光定量PCR仪的应用非常广泛,主要包括基因表达分析、疾病诊断、病原微生物检测、药物研发等领域。例如,在基因表达分析中,qPCR仪可以精确测定特定基因在细胞或组织中的表达水平;在疾病诊断中,qPCR仪可以快速检测病原体或遗传突变,为疾病的早期诊断和治疗提供重要依据。此外,实时荧光定量PCR仪还可以用于药物研发中的基因表达分析和药物筛选等工作。
总之,实时荧光定量PCR仪以其高效、准确、灵敏的特点,在生命科学研究和医学诊断中发挥着越来越重要的作用。