氨基酸测定仪是一种用于测定样品中氨基酸含量的仪器,广泛应用于食品、药品、环保等领域。正确使用氨基酸测定仪进行氨基酸含量的测定,需要遵循以下步骤:
1、样品准备:首先,需要对样品进行适当的处理,以便于氨基酸的测定。对于固体样品,如食品、饲料等,需要进行粉碎、溶解等处理;对于液体样品,如血液、尿液等,需要进行离心、过滤等处理。处理后的样品应为澄清透明的溶液。
2、样品衍生化:氨基酸本身没有紫外或荧光吸收,因此需要将其转化为具有紫外或荧光吸收的衍生物,以便于检测。常用的衍生化试剂有邻苯二甲醛(OPA)、芴甲氧羰酰氯(FMOC)等。将衍生化试剂与样品混合,反应一段时间后,即可得到可检测的氨基酸衍生物。
3、标准曲线制备:为了准确测定样品中的氨基酸含量,需要制备一系列不同浓度的氨基酸标准溶液,并按照与样品相同的方法进行衍生化处理。然后,使用氨基酸测定仪分别测定这些标准溶液的吸光度或荧光强度,绘制出标准曲线。
4、样品测定:将经过衍生化处理的样品溶液加入进样器中,设定好仪器的工作参数,如检测波长、流速等。然后,启动仪器进行测定,记录下样品的吸光度或荧光强度。
5、结果计算:根据样品的吸光度或荧光强度,结合标准曲线,计算出样品中各氨基酸的含量。需要注意的是,由于衍生化反应可能存在的情况,因此需要对测定结果进行校正,以提高准确性。
6、清洗和保养:测定结束后,需要对其进行清洗和保养,以保持仪器的性能和延长使用寿命。清洗时,应使用适当的溶剂,如纯水、甲醇等,避免使用强酸、强碱等可能损坏仪器的试剂。保养时,应定期检查仪器的各个部件,如泵、阀门、检测器等,确保其正常工作。
总之,正确使用氨基酸测定仪进行氨基酸含量的测定,需要注意样品的处理、衍生化反应、标准曲线的制备、测定条件的设定、结果的计算以及仪器的清洗和保养等方面。只有掌握了这些基本操作技能,才能确保测定结果的准确性和可靠性。