在实际应用中，默克色谱柱可能会遇到一些常见问题，这些问题可能涉及到色谱柱的连接、活化、使用、维护和存放。以下是一些常见的问题及其解决方法：
1. 色谱柱连接问题：色谱柱安装时，应注意连接方向，避免接反。连接管接头长度过长可能导致密封不良和泄漏，影响基线漂移或响应降低。理想的接头连接应无死体积，防止管道滑动，并具有良好的长期稳定性。
2. 反相柱活化平衡：新柱活化是一个平衡过程，可能需要用流动相平衡，有时还必须用所测样品对新柱进行平衡，特别是对于分子量较高的多肽。平衡方式简单，多进几次样品直到峰面积和保留时间稳定。
3. 反相柱冲洗并保存：用50:50甲醇或乙腈与水的混合溶液冲洗20-30倍柱体积，然后用纯甲醇或乙腈冲洗20-30倍柱体积；存放前将柱端接头上的塞子密封严密，以防止填料变干。
4. 反相柱清洗和再生：清洗或反冲反相色谱柱时，用至少30倍柱体积的溶剂冲洗。如果压力没有恢复正常，可以考虑使用更强的条件进行清洁，如75%乙腈/25%异丙醇、100%异丙醇、100%二氯甲烷、100%己烷。
5. 色谱柱使用中的常见问题：包括pH值、温度、溶剂耐受性、压力、样品等。色谱柱的使用条件不应超过制造商推荐的范围，包括压力、pH范围、水相耐受性、柱温等。当测试条件接近色谱柱使用范围的极限值时，色谱柱的寿命会受到影响。
6. C18柱的pH和温度调节：通过调节pH和柱温来优化分离度是方法开发中非常重要的方法。中性或不可电离的化合物对pH值的变化不敏感。对于可离子化的化合物，可以通过调节流动相的pH值和控制化合物的电离状态来改变化合物的反相保留。
7. 塔总超压的原因：过压通常是由包括色谱柱在内的液体流路堵塞引起的。需要进行分段排查，确定阻塞位置，然后根据阻塞位置排查阻塞的可能原因。
这些问题及其解决方法可以帮助用户更好地理解和使用默克色谱柱，确保色谱分析的准确性和效率。
