抗酸细菌(AFB)，即分枝菌酸(细胞包膜中的脂质)含量高的细菌，使用抗酸染色进行检测。这些染色区分了AFB，AFB导致诸如肺结核和其他呼吸系统疾病的疾病。AFB通常在特殊的实验室环境中进行测试，因为这些疾病具有高度传染性。无论你测试的是手术标本、呼吸道标本还是痰液标本，这些方案中的两种复染剂要么是亮绿，要么是亚甲蓝；为不耐酸的生物体提供不同的外观。您的病理学家的偏好将决定您应该使用哪种抗酸染色颜色。
此外，这种染色有两种变化——冷染色法(Kinyoun)或热法(泽赫尔·尼尔森)。最初的泽赫尔·尼尔森方法更传统，而金永法由于不需要加热而越来越受欢迎。
抗酸染色
抗酸染色用于鉴定抗酸微生物。这些细菌将被方案染成红色。
抗酸染色(金永或泽赫尔·尼尔森)协议
- Fix the slide.
Kinyoun (cold method)
:淹没载玻片或浸没在Kinyoun石炭酸品红溶液中:5分钟泽赫尔·尼尔森(热法)
:淹没载玻片或浸没在泽赫尔尼森石炭酸品红溶液中，加热:3分钟
可以使用载玻片架或染色单个载玻片。
- 用去离子水轻轻冲洗。
- 使用脱色剂溶液去除大部分污渍，直到洗涤液变得清澈。
- 用去离子水轻轻冲洗。
- 将载玻片浸入亚甲蓝溶液或亮绿溶液中30秒至1分钟。
- 用去离子水轻轻冲洗，然后风干。
- 相应地检查幻灯片。
抗酸微生物被染成红色，而非抗酸微生物和背景被染成绿色或蓝色。分枝杆菌的一个主要特征是它们是“抗酸的”,一旦用苯胺染料，碱性品红染色，它们很难脱色，因此即使暴露于酸性酒精漂洗中也能保持红色。
石炭酸品红被用作抗酸生物的主要染料，因为它在细胞壁脂质中比在酸性醇中更易溶解，所以生物将保留染料的红色。如果你发现抗酸细菌没有像预期的那样保持颜色，请阅读我们关于如何修复不保持染料的抗酸细菌的帖子。
Kinyoun方法也可以修改为弱酸快速染色，它使用5%的硫酸而不是盐酸。除了对分枝杆菌染色外，弱酸性抗酸染色将对脱色后不能保持石炭酸品红的生物体进行染色。
抗酸染色——Ziehl Neelsen
