抗酸微生物通常是在寻找结核病和其他呼吸道疾病或其他分枝杆菌感染时发现的。这些高度传染性的细菌需要特殊的个人防护设备,并且通常需要特殊的规程来确保实验室技术人员或其他标本不会被污染。
抗酸微生物的细胞壁对常规染色有抵抗力。抗酸染色剂努力促进染料的吸收。一旦染色,这些微生物不容易脱色(即使用酒精或酸性丙酮溶液)。这就是它们被称为“抗酸”的原因
石炭酸品红被用作抗酸生物的主要染料,因为它在细胞壁脂质中比在酸性醇中更易溶解,所以生物将保留染料的红色。脱色剂用于从任何非抗酸生物中去除染料,使这种生物易于从抗酸生物中分离和识别。
抗酸微生物的常见问题是,微生物不能保留染色或不能正确染色。因此,这种微生物可能很少或没有红色。
如果抗酸细菌没有像预期的那样保留染料,则执行改良的Kinyoun染色方案。与泽赫尔-尼尔森染色法相比,这种方法使用硫酸代替盐酸,从而使染色的抗酸能力更弱。
- 用金永的石炭酸品红淹没载玻片5分钟。
- 用50%乙醇短暂冲洗载玻片(3-5秒)。
- 用1%硫酸脱色2分钟,或直到载玻片上不再有颜色。
- 用水冲洗载玻片,然后沥干。
- 用亚甲蓝或亮绿复染1-3分钟。
- 用水冲洗,然后风干。
弱酸性抗酸染色应该对脱色后不能保留石炭酸品红的生物进行染色。