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胶原蛋白检测方案

背景简介：

胶原是细胞外基质的重要组分之一，占蛋白含量的25%-30%，是组成动物皮肤、骨骼、肌腱、血管等结缔组织的重要成分。检测胶原蛋白含量可以帮助评估某些疾病的进展或治疗效果，胶原水平的过高或过低都会导致疾病。例如：胶原过多会导致组织纤维化，胶原过少会导致骨关节炎。因此在许多疾病研究中测定胶原水平非常重要。

胶原蛋白常用检测方法：

1）  羟脯氨酸比色法

胶原蛋白的氨基酸，羟脯氨酸。羟脯氨酸是一类非蛋白氨基酸，存在于哺乳动物的弹性蛋白和胶原中。这种氨基酸限于胶原的三螺旋结构中，它的存在增加了三螺旋结构的稳定性。羟脯氨酸在组织中水解被用作分析胶原含量的直接指标。羟脯氨酸含量，即：包括了所有类型的胶原及胶原前体、成熟的胶原、降解的胶原，在570nm处检测吸光度即可，通过换算关系得到总胶原蛋白含量。

2）天狼星红的可溶性胶原蛋白测定

天狼星红是一种特别的染料，它与纤维性胶原（I型至V型）上的[Gly-X-Y]n螺旋结构特异性结合，不区分胶原蛋白种类和胶原类型，因此通过测量其吸光度来定量胶原蛋白。

3) 基于天狼星红的组织切片染色

天狼猩红是一种特别的染料，它与纤维性胶原（I型至V型）上的[Gly-X-Y]n螺旋结构特异性结合，不区分胶原蛋白种类和胶原类型，而固绿（Fast Green）与非胶原蛋白结合。由于天狼星红和固绿分别在540 nm和605 nm处具有吸收，因此提取染料的OD值可用于计算样本的胶原蛋白和非胶原蛋白含量。

北京博蕾德生物科技有限公司提供Quiczyme 总胶原蛋白检测试剂盒（羟脯氨酸原理）用于定量检测组织、细胞样本中的总胶原蛋白含量。

检测原理：

QuickZyme 的总胶原检测试剂盒是基于羟脯氨酸的检测。羟脯氨酸是一类非蛋白氨基酸，存在于哺乳动物的弹性蛋白和胶原中。这种氨基酸限于家园的三螺旋结构中，它的存在增加了三螺旋结构的稳定性。羟脯氨酸在组织中水解被用作分析胶原含量的直接指标。试剂盒检测样本中总的羟脯氨酸含量，即：包括了所有类型的胶原及胶原前体、成熟的胶原、降解的胶原，在570nm处检测吸光度即可。试剂盒和操作简单，不需做水解后的干燥步骤（需要特殊设备）。

产品优势：

l  用于检测所有类型的的胶原。

l  不受种属限制

l  方便、快捷

l  线性范围广

l  基于羟脯氨酸的分析检测

l  不受提取方法限制

l  不需特殊的检测设备

产品特点：

检测范围：6-300ug/ml

灵敏度：2.5ug/ml

样本量：50-500ul

检测样本：细胞提取物、组织提取物、不受种属限制、不受胶原类型限制。

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